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Visualisation de la proximité induite par les caspases inflammatoires dans les macrophages dérivés des monocytes humains
JoVE 신문
면역학 및 감염병학
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Visualization of Inflammatory Caspases Induced Proximity in Human Monocyte-Derived Macrophages
DOI:

08:41 min

April 06, 2022

,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:51Preparation of Cells for Electroporation
  • 02:11Nucleofection of Caspase BiFC Components into Human Monocyte-Derived Macrophages
  • 04:41Treatment of Transfected MDM and Caspase BiFC Data Acquisition
  • 06:37Results: Differentiation of CD14-Monocytes and Transfection of Human Monocyte-Derived Macrophages
  • 08:12Conclusion

Summary

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Ce protocole décrit le flux de travail pour obtenir des macrophages dérivés des monocytes (MDM) à partir d’échantillons de sang humain, une méthode simple pour introduire efficacement des rapporteurs de complémentation de fluorescence bimoléculaire (BiFC) de caspase inflammatoire dans le MDM humain sans compromettre la viabilité et le comportement des cellules, et une approche basée sur l’imagerie pour mesurer l’activation des caspases inflammatoires dans les cellules vivantes.

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