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Bestimmung der Rolle von maternal exprimierten Genen in der frühen Entwicklung mit mütterlichen Crispants
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Determining the Role of Maternally-Expressed Genes in Early Development with Maternal Crispants
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Bestimmung der Rolle von maternal exprimierten Genen in der frühen Entwicklung mit mütterlichen Crispants

DOI:
10.3791/63177-v

•

10:08 min

•

December 21, 2021

•

, ,
1Laboratory of Genetics,University of Wisconsin-Madison

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:56Synthesis of Guide RNAs
  • 02:03Microinjection of CRISPR-Cas9 Cocktail into a One-Cell Zebrafish Embryo to Generate Maternal Crispants
  • 03:07Screening for Somatic INDELs in F0 Injected Embryos
  • 04:54Identification of Maternal-Effect Phenotypes in Maternal Crispant Embryos
  • 06:21Sequencing Alleles in Maternal Crispant Haploids
  • 08:18Results: Identification of Maternal Effect Phenotypes in a Rapid and Resource Efficient Manner
  • 09:08Conclusion

Summary

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Die frühe Entwicklung hängt von mütterlich vererbten Produkten ab, und die Rolle vieler dieser Produkte ist derzeit unbekannt. Hier haben wir ein Protokoll beschrieben, das CRISPR-Cas9 verwendet, um mütterliche Phänotypen in einer einzigen Generation zu identifizieren.

Tags

Keywords: Maternal CRISPRMaternal Effect GenesEarly DevelopmentEmbryogenesisGuide RNAIn-vitro TranscriptionZebrafishEmbryo Injection

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