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Investigación del metabolismo cardíaco en el corazón de ratón perfundido aislado con piruvato hiperpolarizado [1-13C] y espectroscopia de RMN 13C / 31P
JoVE 신문
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JoVE 신문 생물학
Investigating Cardiac Metabolism in the Isolated Perfused Mouse Heart with Hyperpolarized [1-13C]Pyruvate and 13C/31P NMR Spectroscopy
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Investigación del metabolismo cardíaco en el corazón de ratón perfundido aislado con piruvato hiperpolarizado [1-13C] y espectroscopia de RMN 13C / 31P

DOI:
10.3791/63188-v

•

14:56 min

•

April 21, 2023

•

, , , , ,
1Department of Radiology, Hadassah Medical Organization and Faculty of Medicine,Hebrew University of Jerusalem, 2The Wohl Institute for Translational Medicine

Chapters

  • 00:03Introduction
  • 01:17Krebs-Henseleit Buffer Preparation
  • 01:45Perfusion System Preparation
  • 02:29Calibration and Preparation of the NMR Spectrometer for Acquisition
  • 03:22Animal Preparation, Surgical Procedure, and Perfusion of the Heart in the NMR Tube
  • 09:23Acquiring Data for Cardiac Energetics and pH
  • 10:09DNP Spin Polarization and Dissolution
  • 11:25Hyperpolarized 13C Spectroscopy
  • 12:07Representative Results
  • 14:40Conclusion

Summary

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Describimos una configuración experimental para administrar metabolitos hiperpolarizados marcados con 13C en modo de perfusión continua a un corazón de ratón perfundido aislado. Un enfoque dedicado de adquisición de 13C-RMN permitió la cuantificación de la actividad enzimática metabólica en tiempo real, y un análisis multiparamétrico de 31R-P permitió la determinación del contenido de ATP tisular y el pH.

Tags

Keywords: Hyperpolarized MRICardiac MetabolismIsolated Perfused Mouse HeartPyruvate Metabolism13C/31P NMR SpectroscopyKrebs-Henseleit BufferAerobic And Anaerobic MetabolismCardiac EnergeticsPHLactateInorganic PhosphatePerfusion SystemTemperature Control

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