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Diferenciação de células-tronco pluripotentes humanas em precursores de células beta pancreáticas em um sistema de cultura 2D
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JoVE 신문 발생학
Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells Into Pancreatic Beta-Cell Precursors in a 2D Culture System

Diferenciação de células-tronco pluripotentes humanas em precursores de células beta pancreáticas em um sistema de cultura 2D

DOI:
10.3791/63298-v

•

10:12 min

•

December 16, 2021

•

,
1College of Health and Life Sciences,Hamad Bin Khalifa University (HBKU), Qatar Foundation, 2Diabetes Research Center, Qatar Biomedical Research Institute (QBRI),Hamad Bin Khalifa University (HBKU), Qatar Foundation (QF)

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:22Induction of Definitive Endoderm Differentiation in Human Pluripotent Stem Cells (hPSCs) (Stage 1)
  • 02:10Immunofluorescence Analysis of hPSC-Derived Definitive Endoderm (Stage 1)
  • 04:19Generation of the Primitive Gut Tube from hPSCs (Stage 2)
  • 05:50Assessment of Differentiation Efficiency of Generating Pancreatic Progenitors
  • 08:10Results: Comparison between Optimized and Non-Optimized Protocol for Scalable Generation of Pancreatic Progenitors from hPSCs
  • 09:21Conclusion

Summary

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O presente protocolo descreve um método aprimorado para aumentar a co-expressão dos fatores de transcrição PDX1 e NKX6.1 em progenitores pancreáticos derivados de células-tronco pluripotentes humanas (hPSCs) em monocamadas planares. Isto é conseguido reabastecendo a matriz fresca, manipulando a densidade celular e dissociando as células endodérmicas.

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Keywords: Human Pluripotent Stem CellsPancreatic Beta-cell Precursors2D Culture SystemCell TherapyDiabetesPancreatic DevelopmentDefinitive EndodermDifferentiationImmunocytochemistryCHIR-99021

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