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Dépistage en pool de la bibliothèque d’ARNH pour identifier les facteurs qui modulent un phénotype de résistance aux médicaments
JoVE 신문
암 연구학
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JoVE 신문 암 연구학
Pooled shRNA Library Screening to Identify Factors that Modulate a Drug Resistance Phenotype
DOI:

14:51 min

June 17, 2022

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Chapters

  • 00:00Introduction
  • 00:24Selection of the Most Potent Promoter to Obtain Persistent and Prolonged Expression of the shRNAs
  • 02:01Preparation of Pooled Lentiviral Human Epigenetic Factor shRNA Library
  • 04:48Estimation of the Transduction Efficiency of Lentiviruses
  • 06:03Transduction of Pooled Epigenetic shRNA Library in the Drug-Resistant Cell Line
  • 07:20Enrichment of GFP Positive Cells
  • 07:54Dropout Screening to Identify Epigenetic Factors Mediating Drug Resistance
  • 09:20Amplification of the Integrated shRNAs by PCR
  • 11:08Next-Generation Sequencing and Data Analysis
  • 11:57Representative Results
  • 14:30Conclusion

Summary

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Le dépistage par interférence ARN (ARNi) à haut débit à l’aide d’un pool d’ARNs lentiviraux peut être un outil pour détecter des cibles létales synthétiques pertinentes sur le plan thérapeutique dans les tumeurs malignes. Nous fournissons une approche de dépistage de l’ARNs pour étudier les effecteurs épigénétiques de la leucémie myéloïde aiguë (LAM).

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