Journal
/
Biochemistry
/
Rutinemessig innsamling av kryo-EM-datasett med høy oppløsning ved bruk av 200 KV-transmisjonselektronmikroskop
JoVE Journal
Biochemistry
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemistry
Routine Collection of High-Resolution cryo-EM Datasets Using 200 KV Transmission Electron Microscope

Rutinemessig innsamling av kryo-EM-datasett med høy oppløsning ved bruk av 200 KV-transmisjonselektronmikroskop

DOI:
10.3791/63519-v

•

09:49 min

•

March 16, 2022

•

, , , , , , , , ,
1Materials and Structural Analysis Division,Thermo Fisher Scientific, 2Max Planck Institute of Biochemistry, Molecular Structural Biology, 3Materials and Structural Analysis Division,Thermo Fisher Scientific

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:27Grid Loading, Mapping, and Selection of Best Cryo-EM Grids for Data Collection
  • 02:36Setting up a Data Collection Session in the Single Particle Analysis Software
  • 05:44Final Microscope Alignments Before Starting Data Collection
  • 07:15Results: Gallery of Grids, Cryo-EM Reconstruction of Apo-Ferritin, and Effect of Energy Filtering on Cryo-EM Images
  • 08:56Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Høyoppløselige kryo-EM-kart over makromolekyler kan også oppnås ved å bruke 200 kV TEM mikroskoper. Denne protokollen viser de beste fremgangsmåtene for å angi nøyaktige optikkjusteringer, datainnsamlingsordninger og valg av bildeområder som alle er avgjørende for vellykket innsamling av datasett med høy oppløsning ved hjelp av en 200 kV TEM.

Tags

Cryo-EM200 KV TEMHigh-resolutionProtein StructureProtein ComplexesMolecular MechanismsStructure-based Drug DesignApoferritinProteasomeAuto GridsLiquid NitrogenAutomated Data CollectionAtlasEPU

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/63519?article_type=v

Høyoppløselig enkeltpartikkelanalyse fra elektronkryomikroskopi bilder ved hjelp av SPHIRE
check_url/63519?article_type=v

Kryo-EM og enkeltpartikkelanalyse med scipion
check_url/63519?article_type=v

Utarbeidelse av prøvestøttefilmer i transmisjonselektronmikroskopi ved hjelp av en støtteflytblokk
check_url/63519?article_type=v

Forbereder lameller fra glassaktige biologiske prøver ved hjelp av et dual-beam skanning elektronmikroskop for kryo-elektrontomografi
check_url/63519?article_type=v

Klargjøring av høytemperatur prøvegitter for Cryo-EM
check_url/63519?article_type=v

Mikropattering overføring elektronmikroskopinett til direkte celleposisjonering i hele celler Cryo-Electron Tomography Arbeidsflyter
check_url/63519?article_type=v

Kvantifisering av subcellulær glykogenfordeling i skjelettmuskulaturfibre ved hjelp av transmisjonselektronmikroskopi
check_url/63519?article_type=v

En robust kryo-elektronmikroskopi (cryo-EM) prosesseringsarbeidsflyt med kryoSPARC, RELION og scipion
check_url/63519?article_type=v

Fremme høyoppløselig avbildning av virussamlinger i væske og is
check_url/63519?article_type=v

Kryo-EM-datainnsamling med enkeltpartikler med scenetilt ved bruk av Leginon

Read Article