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Ensaio de Potencial de Membrana Baseado em Fluorescência para Estudo Funcional de Alto Rendimento de Dois Canais Iônicos Endógenos em Duas Linhagens Celulares Epiteliais
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
A Fluorescence-Based Assay of Membrane Potential for High-Throughput Functional Study of Two Endogenous Ion Channels in Two Epithelial Cell Lines

Ensaio de Potencial de Membrana Baseado em Fluorescência para Estudo Funcional de Alto Rendimento de Dois Canais Iônicos Endógenos em Duas Linhagens Celulares Epiteliais

DOI:
10.3791/63528-v

•

06:59 min

•

June 22, 2022

•

, , ,
1Molecular Medicine,Hospital for Sick Children, 2Cell Biology,Hospital for Sick Children, 3Department of Physiology,University of Toronto, 4Department of Paediatrics,University of Toronto, 5Department of Biochemistry,University of Toronto

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:46Cell Plating and Differentiation
  • 02:33CFTR Functional Assay
  • 05:24Results: Measurement of CFTR Channel Activity
  • 06:22Conclusion

Summary

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Este protocolo descreve um método para o estudo de proteínas de membrana eletrogênicas através da medição de mudanças no potencial de membrana. Este ensaio fornece uma plataforma para a leitura funcional de múltiplos canais iônicos expressos endogenamente em linhagens celulares epiteliais.

Tags

Keywords: Fluorescence-based AssayMembrane PotentialHigh-throughputIon ChannelsEpithelial CellsCalu-3Caco-2Cell CultureTrypsin96-well Plate384-well PlateSodium-free BufferChloride-free BufferNMDG

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