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Microscopía confocal para medir tres modos de dinámica de poros de fusión en células cromafines suprarrenales
JoVE 신문
신경과학
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JoVE 신문 신경과학
Confocal Microscopy to Measure Three Modes of Fusion Pore Dynamics in Adrenal Chromaffin Cells
DOI:

12:30 min

March 16, 2022

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:07Bovine Chromaffin Cell Culture
  • 02:52Transfection with Electroporation
  • 04:18Preparation for Patch-Clamp Recording and Confocal Imaging
  • 05:41Patch-Clamp Recording and Confocal Imaging
  • 09:01Confocal Imaging Data Analysis
  • 10:21Results: Whole-Cell Voltage-Clamp Recordings and Visualization of Fusion Events Under Confocal Microscope
  • 11:52Conclusion

Summary

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Este protocolo describe una técnica de imagen confocal para detectar tres modos de fusión en células cromafines suprarrenales bovinas. Estos modos de fusión incluyen 1) fusión cerrada (también llamada kiss-and-run), que involucra la apertura y el cierre del poro de fusión, 2) la fusión de permanencia, que involucra la apertura del poro de fusión y el mantenimiento del poro abierto, y 3) la fusión retráctil, que involucra la contracción de la vesícula fusionada.

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