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니트로환원효소/메트로니다졸 매개 절제 및 제브라피쉬 망막 색소 상피의 재생 연구를 위한 MATLAB 플랫폼(RpEGEN)
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JoVE 신문 생물학
Nitroreductase/Metronidazole-Mediated Ablation and a MATLAB Platform (RpEGEN) for Studying Regeneration of the Zebrafish Retinal Pigment Epithelium
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니트로환원효소/메트로니다졸 매개 절제 및 제브라피쉬 망막 색소 상피의 재생 연구를 위한 MATLAB 플랫폼(RpEGEN)

DOI:
10.3791/63658-v

•

13:12 min

•

March 02, 2022

•

, ,
1Department of Ophthalmology, Louis J. Fox Center for Vision Restoration,University of Pittsburgh School of Medicine, 2Earth Research Institute,University of California, Santa Barbara, 3Department of Developmental Biology,University of Pittsburgh School of Medicine

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:00Screening Zebrafish Larvae for rpe65a:nfsB-eGFP and Genetic Ablation of the Retinal Pigment Epithelium
  • 03:02Incorporating Pharmacological Treatment into Zebrafish Retinal Pigment Epithelium Ablation Protocol
  • 06:35Confocal Microscope Z-stack Image Preprocessing in FIJI (ImageJ)
  • 08:19Quantification and Visualization of RPE Regeneration Using RpEGEN Scripts
  • 10:42Results: RPE Expression, Ablation, Regeneration Quantification
  • 12:39Conclusion

Summary

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이 프로토콜은 형질전환 제브라피쉬 모델을 사용하여 망막 색소 상피(RPE)를 유전적으로 제거하는 방법론을 기술한다. 약리학적 화합물을 이용한 신호전달 경로 조절을 통합하도록 프로토콜을 적응시키는 것은 광범위하게 상세하다. 색소침착을 기반으로 RPE 재생을 정량화하기 위한 MATLAB 플랫폼이 개발되어 발표되고 논의됩니다.

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Keywords: ZebrafishRetinal Pigment EpitheliumRPERegenerationNitroreductaseMetronidazoleMATLABRpEGENAblationTransgenicEGFPPTUPharmacological Treatment

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