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タンパク質リン酸化の定量のための最適化された1分子プルダウンアッセイ
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생화학
An Optimized Single-Molecule Pull-Down Assay for Quantification of Protein Phosphorylation
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タンパク質リン酸化の定量のための最適化された1分子プルダウンアッセイ
DOI:
10.3791/63665-v
•
07:45 min
•
June 06, 2022
•
Elizabeth M. Bailey
,
Emanuel Salazar-Cavazos
,
Rachel M. Grattan
,
Michael J. Wester
,
David J. Schodt
,
Julian A. Rojo
,
Keith A. Lidke
3
,
Diane S. Lidke
3
1
Department of Pathology
,
University of New Mexico School of Medicine
,
2
Department of Physics and Astronomy
,
University of New Mexico
,
3
Comprehensive Cancer Center
,
University of New Mexico Health Sciences Center
Chapters
00:04
Introduction
00:53
Coverslip Preparation
03:18
Functionalization of Array with Biotinylated Antibody
04:09
SiMPull of Proteins of Interest from Whole-Cell Lysates
04:40
Image Acquisition
05:45
Results: Capture of EGFR-GFP from Protein Lysates Using SiMPull
07:19
Conclusion
Summary
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本プロトコルは、改良された一分子プルダウン(SiMPull)アッセイを用いてタンパク質リン酸化を定量するためのサンプル調製およびデータ分析について記載する。
Tags
AI-powered Protein Phosphorylation Quantification
Single-molecule Pull-down Assay
SiMPull Protocol
Antibody Labeling
Autofluorescence Reduction
Single-molecule Analysis
Phosphorylation Status Of Individual Proteins
Alternative To Western Blotting And Mass Spectrometry
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