JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.
Chapters
- 00:04Introduction
- 00:58Preparation of CRISPR Gene Editing and Guide RNA Design to Generate miRNA Cluster Knockout Cell Lines
- 02:06Generation of Stable Lentiviral Cell Lines Carrying the DOX-Inducible Cas9 Expression Cassette
- 03:20Performing CRISPR Reactions by Cas9 Induction and Synthetic Guide RNA Transfection of Cells Using a High-Throughput Format
- 07:22PCR Genotyping of CRISPR Cell Lines Using Crude Cell Lysates
- 08:37Results: High-Throughput CRISPR Experimental Design to Generate Multiple miR-888 Cluster Deletion Combinations
- 09:51Conclusion
يصف هذا البروتوكول سير عمل التحرير الجيني للتحرير الجيني للتكرار الباليندرومي القصير (CRISPR) عالي الإنتاجية المتجمع بانتظام لتحليل شبكة مجموعة microRNA التي تسمح بالتوليد السريع للوحة من خطوط الخلايا المعدلة وراثيا التي تحمل مجموعات فريدة من نوعها لحذف أعضاء مجموعة miRNA بحجم 35 كيلو بايت في تجربة واحدة.
