Vi beskriver ett reproducerbart, automatiserat och opartiskt bildsystem för att karakterisera neuromuskulär korsningsfunktion med hjälp av mänskligt konstruerad skelettmuskelvävnad och optogenetiska motoneuroner. Detta system möjliggör funktionell kvantifiering av neuromuskulär anslutning över tid och detekterar minskad neuromuskulär funktion orsakad av neurotoxiner och myasthenia gravis patient serum.