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Une approche basée sur la spectrométrie de masse pour identifier les phosphoprotéines phosphatases et leurs interacteurs
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JoVE 신문 생화학
A Mass Spectrometry-Based Approach to Identify Phosphoprotein Phosphatases and their Interactors
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Une approche basée sur la spectrométrie de masse pour identifier les phosphoprotéines phosphatases et leurs interacteurs

DOI:
10.3791/63805-v

•

10:17 min

•

April 29, 2022

•

,
1Department of Biochemistry and Cell Biology,Geisel School of Medicine at Dartmouth, 2Norris Cotton Cancer Center

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:46Sample Preparation
  • 02:26Preparation of Phosphatase Inhibitor Beads
  • 04:03Washing and Elution of PPPs from the PIBs
  • 05:40Data Analysis
  • 08:30Results: Identification of Specific PIB Binders in HeLa Cells
  • 09:37Conclusion

Summary

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Nous présentons ici un protocole pour l’enrichissement des phosphoprotéines phosphatases endogènes et de leurs protéines en interaction à partir de cellules et de tissus et leur identification et quantification par spectrométrie de masse protéomique.

Tags

Phosphoprotein PhosphatasesPIB-MSMass SpectrometryProteomicsPhosphatase InteractorsCell LysisProtein QuantificationPhosphatase Inhibitor ControlPhosphatase Inhibitor Beads

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