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Medindo o Número de Cópias de DNA Mitocondrial de Célula Única e a Heteroplasmia Usando a Reação em Cadeia da Polimerase de Gotículas Digitais
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Measuring Single-Cell Mitochondrial DNA Copy Number and Heteroplasmy Using Digital Droplet Polymerase Chain Reaction

Medindo o Número de Cópias de DNA Mitocondrial de Célula Única e a Heteroplasmia Usando a Reação em Cadeia da Polimerase de Gotículas Digitais

DOI:
10.3791/63870-v

•

09:15 min

•

July 12, 2022

•

,
1Department of Clinical Neurosciences, School of Clinical Medicine,University of Cambridge, Cambridge Biomedical Campus, 2Medical Research Council Mitochondrial Biology Unit,University of Cambridge, Cambridge Biomedical Campus

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:52Preparation of Samples
  • 01:51Generation of Droplets
  • 04:16PCR and Droplet Reading
  • 06:07Analysis of Results
  • 07:13Results: Measuring Mitochondrial DNA Copy Number and Heteroplasmy in Single Cells
  • 08:28Conclusion

Summary

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Aqui apresentamos um protocolo para medir o número absoluto de cópias mitocondriais (mt)DNA e os níveis de heteroplasmia de deleção do mtDNA em células únicas.

Tags

Mitochondrial DNASingle-cellDigital Droplet PCRHeteroplasmyCopy NumberCell LysisSingle-cell SortingMaster MixDroplet GenerationNon-template Control

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