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Visualisierung der Dynamik der Kopplungsdynamik von Aktin und Mikrotubuli in vitro durch Total-Internal-Reflection-Fluoreszenz-Mikroskopie (TIRF)
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Visualizing Actin and Microtubule Coupling Dynamics In Vitro by Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy
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Visualisierung der Dynamik der Kopplungsdynamik von Aktin und Mikrotubuli in vitro durch Total-Internal-Reflection-Fluoreszenz-Mikroskopie (TIRF)

DOI:
10.3791/64074-v

•

08:44 min

•

July 20, 2022

•

1Department of Biochemistry & Molecular Biology, and Department of Neuroscience & Physiology,State University of New York (SUNY) Upstate Medical University

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:40Coating Cleaned Coverslips with mPEG- and Biotin-PEG-Silane
  • 01:21Assembling Imaging Flow Chambers
  • 02:50Conditioning of Perfusion Chambers
  • 03:47Microscope Preparation
  • 04:40Preparation of Protein Reaction Mixes
  • 06:02Image Actin and Microtubule Dynamics
  • 06:43Results: Example Measurements of Microtubules and Actin Filament Dynamics
  • 08:14Conclusion

Summary

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Dieses Protokoll ist ein Leitfaden für die Visualisierung von dynamischem Aktin und Mikrotubuli unter Verwendung eines in vitro TIRF-Mikroskopie-Assays ( Total Internal Fluorescence).

Tags

Keywords: ActinMicrotubuleTIRF MicroscopyPEG-SilaneBiotin-PEG-SilaneCover SlipImaging ChamberEpoxy ResinPerfusion ChamberConditioning SolutionsTotal Internal Reflection Fluorescence

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