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Visualizzazione delle dinamiche di accoppiamento di actina e microtubuli in vitro mediante microscopia a fluorescenza a riflessione interna totale (TIRF)

JoVE 신문
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JoVE 신문 생화학

Visualizing Actin and Microtubule Coupling Dynamics In Vitro by Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy

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Visualizzazione delle dinamiche di accoppiamento di actina e microtubuli in vitro mediante microscopia a fluorescenza a riflessione interna totale (TIRF)

DOI:

10.3791/64074-v

•

08:44 min

•

July 20, 2022

•

Jessica L. Henty-Ridilla

¹Department of Biochemistry & Molecular Biology, and Department of Neuroscience & Physiology,State University of New York (SUNY) Upstate Medical University

Chapters

00:04Introduction
00:40Coating Cleaned Coverslips with mPEG- and Biotin-PEG-Silane
01:21Assembling Imaging Flow Chambers
02:50Conditioning of Perfusion Chambers
03:47Microscope Preparation
04:40Preparation of Protein Reaction Mixes
06:02Image Actin and Microtubule Dynamics
06:43Results: Example Measurements of Microtubules and Actin Filament Dynamics
08:14Conclusion

Summary

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Questo protocollo è una guida per la visualizzazione dinamica di actina e microtubuli utilizzando un test di microscopia a fluorescenza interna totale (TIRF) in vitro .

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