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Far-Red Fluoreszenz-Seneszenz-assoziierte β-Galactosidase-Sonde zur Identifizierung und Anreicherung von seneszenten Tumorzellen mittels Durchflusszytometrie
JoVE 신문
암 연구학
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JoVE 신문 암 연구학
Far-Red Fluorescent Senescence-Associated β-Galactosidase Probe for Identification and Enrichment of Senescent Tumor Cells by Flow Cytometry
DOI:

14:01 min

September 13, 2022

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:16Induction of Senescence by Chemotherapy Drugs in Cultured Cancer Cells
  • 03:29DDAO-Galactoside Staining of Senescence-Associated Beta-Galactosidase (SA-β-Gal) in Cell or Tumor Samples
  • 04:56Flow Cytometer Setup and Data Acquisition
  • 06:27Flow Cytometry Data Analysis
  • 09:01Results: Screening Tumors and Chemotherapy Agents for the Induction of Senescence
  • 13:06Conclusion

Summary

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Ein Protokoll zur fluoreszierenden, durchflusszytometrischen Quantifizierung von seneszenten Krebszellen, die durch Chemotherapeutika in Zellkultur oder in murinen Tumormodellen induziert werden, wird vorgestellt. Optionale Verfahren umfassen die Co-Immunfärbung, die Probenfixierung zur Erleichterung der Analyse großer Chargen oder Zeitpunkte sowie die Anreicherung lebensfähiger seneszenter Zellen durch durchflusszytometrische Sortierung.

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