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사카로마이세스 세레비시아에서 근접 결찰 및 정량적 PCR을 통한 상동 재조합 중간체의 검출

JoVE 신문
유전학

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JoVE 신문 유전학

Detection of Homologous Recombination Intermediates via Proximity Ligation and Quantitative PCR in Saccharomyces cerevisiae

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사카로마이세스 세레비시아에서 근접 결찰 및 정량적 PCR을 통한 상동 재조합 중간체의 검출

DOI:

10.3791/64240-v

•

07:55 min

•

September 11, 2022

•

Diedre Reitz, Jérôme Savocco, Aurèle Piazza, Wolf-Dietrich Heyer³

¹Department of Microbiology & Molecular Genetics,University of California, Davis, ²Laboratory of Biology & Modeling of the Cell,École Normale Supérieure de Lyon, ³Department of Molecular & Cellular Biology,University of California, Davis

Chapters

00:05Introduction
00:50DLC Assay
01:54Cell Spheroplasting, Lysis, and Restriction Site Restoration
03:19Restriction Enzyme Digest and Intramolecular Ligation
05:15Results: DLC and DLE Assay Analysis of D-Loops After DSB Induction
07:02Conclusion

Summary

자동 번역

D-루프 포획(DLC) 및 D-루프 확장(DLE) 분석은 정량적 PCR과 함께 근접 결찰 원리를 활용하여 사카로마이세스 세레비시아에서 유도성 이중 가닥 절단 부위에서 D-루프 형성, D-루프 확장 및 생성물 형성을 정량화합니다.

Tags

Keywords: Homologous Recombination D-loop Proximity Ligation Quantitative PCR Saccharomyces Cerevisiae BRCA2 Bloom Syndrome Werner Syndrome UV Cross-linking Spheroplasting Restriction Enzyme Buffer

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