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Detección de intermediarios de recombinación homóloga mediante ligadura de proximidad y PCR cuantitativa en Saccharomyces cerevisiae
JoVE 신문
유전학
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JoVE 신문 유전학
Detection of Homologous Recombination Intermediates via Proximity Ligation and Quantitative PCR in Saccharomyces cerevisiae
DOI:

07:55 min

September 11, 2022

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:50DLC Assay
  • 01:54Cell Spheroplasting, Lysis, and Restriction Site Restoration
  • 03:19Restriction Enzyme Digest and Intramolecular Ligation
  • 05:15Results: DLC and DLE Assay Analysis of D-Loops After DSB Induction
  • 07:02Conclusion

Summary

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Los ensayos de captura de bucle D (DLC) y extensión de bucle D (DLE) utilizan el principio de ligadura de proximidad junto con PCR cuantitativa para cuantificar la formación de bucle D, la extensión del bucle D y la formación de productos en el sitio de una ruptura ducible de doble cadena en Saccharomyces cerevisiae.

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