Denna studie presenterar en detaljerad procedur för att utföra enmolekylära fluorescensresonansenergiöverföringsexperiment (smFRET) på G-proteinkopplade receptorer (GPCR) med hjälp av platsspecifik märkning via onaturlig aminosyra (UAA) införlivande. Protokollet innehåller en steg-för-steg-guide för smFRET-provberedning, experiment och dataanalys.