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Microéchantillonnage dans l’analyse protéique ciblée basée sur la spectrométrie de masse de protéines de faible abondance
JoVE 신문
화학
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JoVE 신문 화학
Microsampling in Targeted Mass Spectrometry-Based Protein Analysis of Low-Abundance Proteins
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Microéchantillonnage dans l’analyse protéique ciblée basée sur la spectrométrie de masse de protéines de faible abondance

DOI:
10.3791/64473-v

•

10:21 min

•

January 13, 2023

•

, , ,
1Department of Pharmacy,University of Oslo

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:46Preparation of Antibody-Coated Magnetic Beads
  • 03:41Volumetric Absorptive Microsampling and Elution
  • 04:38Digestion of Eluted VAMS
  • 05:30The Capture of Proteotypic ProGRP Using Antibody-Coated Magnetic Beads
  • 07:37Analysis by LC-MS/MS
  • 08:26Results: Analysis of the MS Chromatograms and Base Peak Chromatograms of the Proteotypic Peptide
  • 09:42Conclusion

Summary

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Un protocole est présenté pour la détermination de biomarqueurs de faible abondance à partir d’échantillons de sérum séché illustrés par le peptide de libération de progastrine biomarqueur (ProGRP). Les billes magnétiques enrobées d’anticorps sont utilisées pour le nettoyage sélectif et l’enrichissement d’un peptide ProGRP protéotypique. Le peptide capturé est ensuite analysé par chromatographie liquide-spectrométrie de masse en tandem.

Tags

MicrosamplingTargeted Mass SpectrometryProtein AnalysisLow-abundance ProteinsAffinity CleanupProtein ProteolysisAntibodyPH AdjustmentMagnetic BeadsAntibody CouplingBorate BufferCoupling Buffer

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