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使用酿酒酵母中的5-乙炔基-2'-脱氧尿苷掺入测定S相持续时间
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JoVE 신문 생물학
Determination of S-Phase Duration Using 5-Ethynyl-2′-deoxyuridine Incorporation in Saccharomyces cerevisiae
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使用酿酒酵母中的5-乙炔基-2'-脱氧尿苷掺入测定S相持续时间

DOI:
10.3791/64490-v

•

08:40 min

•

October 21, 2022

•

, ,
1Institut de Génétique Moléculaire de Montpellier,Université de Montpellier, CNRS

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:42Saccharomyces cerevisiae Cell Culture
  • 02:00EdU Labeling
  • 02:40Cell Fixation and Permeabilization
  • 03:20Click-It Reaction for Cytometry Analysis
  • 06:32Results: Using EdU Labeling to Determine the S-Phase Duration in Saccharomyces cerevisiae
  • 07:56Conclusion

Summary

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我们描述了两种互补的方案，以使用EdU（一种胸苷类似物）准确确定 酿酒酵母 的S期持续时间，该EdU在 体内 掺入并通过显微镜和流式细胞术使用Click化学进行检测。它可以轻松表征突变体中DNA复制的持续时间和被忽视的复制缺陷。

Tags

S-phase Duration5-Ethynyl-2′-deoxyuridineSaccharomyces CerevisiaeCell Cycle RegulationSynchronized Budding YeastAlpha FactorEDU LabelingPI-EDU Bivariate Plot

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