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出芽酵母における5-エチニル-2'-デオキシウリジンの取り込みを用いたS期持続時間の決定
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Determination of S-Phase Duration Using 5-Ethynyl-2′-deoxyuridine Incorporation in Saccharomyces cerevisiae
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出芽酵母における5-エチニル-2'-デオキシウリジンの取り込みを用いたS期持続時間の決定

DOI:
10.3791/64490-v

•

08:40 min

•

October 21, 2022

•

, ,
1Institut de Génétique Moléculaire de Montpellier,Université de Montpellier, CNRS

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:42Saccharomyces cerevisiae Cell Culture
  • 02:00EdU Labeling
  • 02:40Cell Fixation and Permeabilization
  • 03:20Click-It Reaction for Cytometry Analysis
  • 06:32Results: Using EdU Labeling to Determine the S-Phase Duration in Saccharomyces cerevisiae
  • 07:56Conclusion

Summary

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我々は、in vivoに組み込まれ、顕微鏡およびフローサイトメトリーによってクリックケミストリーを使用して検出されるチミジン類似体であるEdUを使用して、S.cerevisiaeのS期持続時間を正確に決定するための2つの補完的なプロトコルについて説明します。これにより、DNA複製の持続時間や変異体の見落とされた複製欠陥を簡単に特徴付けることができます。

Tags

S-phase Duration5-Ethynyl-2′-deoxyuridineSaccharomyces CerevisiaeCell Cycle RegulationSynchronized Budding YeastAlpha FactorEDU LabelingPI-EDU Bivariate Plot

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