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細菌細胞での共発現と組み合わせたプルダウンアッセイは、困難なタンパク質間相互作用をテストするための時間効率の良いツールとして
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JoVE 신문 생화학
Pulldown Assay Coupled with Co-Expression in Bacteria Cells as a Time-Efficient Tool for Testing Challenging Protein-Protein Interactions
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細菌細胞での共発現と組み合わせたプルダウンアッセイは、困難なタンパク質間相互作用をテストするための時間効率の良いツールとして

DOI:
10.3791/64541-v

•

07:03 min

•

December 23, 2022

•

, , , ,
1Department of the Control of Genetic Processes, Institute of Gene Biology,Russian Academy of Sciences, 2Center for Precision Genome Editing and Genetic Technologies for Biomedicine, Institute of Gene Biology,Russian Academy of Sciences

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:56Co-Transformation of Escherichia coli
  • 02:18Expression
  • 03:21Pulldown Assay
  • 04:52Results: Bacterial Co-Expression of Differentially Tagged Proteins
  • 06:15Conclusion

Summary

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ここでは、適合ベクターのセットを使用して、タグ差のあるタンパク質を細菌で共発現させる方法について説明し、その後、 in vitroで組み立てられないタンパク質複合体を研究するための従来のプルダウン技術について説明します。

Tags

Pulldown AssayProtein-protein InteractionsCo-expressionHeterodimersProtein Complex AssemblyExpression OptimizationRapid ScreeningEscherichia ColiBacterial TransformationIPTG InductionCell LysisAffinity Purification

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