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Detección de espermatozoides para el aislamiento rápido de ediciones de la línea germinal en el pez cebra
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JoVE 신문 유전학
Screening Sperm for the Rapid Isolation of Germline Edits in Zebrafish
DOI:

05:55 min

February 10, 2023

, ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:50Fish Sperm Collection
  • 02:11DNA Extraction and Amplification
  • 03:14PCR Amplicon Separation by Gel Electrophoresis
  • 04:20Results: Mutation Analysis of Sperm
  • 05:16Conclusion

Summary

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Las tecnologías CRISPR-Cas han revolucionado el campo de la edición del genoma. Sin embargo, encontrar y aislar la edición de la línea germinal deseada sigue siendo un cuello de botella importante. Por lo tanto, este protocolo describe un método robusto para examinar rápidamente el esperma de pez cebra inyectado con CRISPR F0 para ediciones de la línea germinal utilizando técnicas estándar de PCR, digestión de restricción y electroforesis en gel.

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