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Untersuchung der Biologie und des Stoffwechsels von beigefarbenem Fett mit dem CRISPR SunTag-p65-HSF1 Aktivierungssystem
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JoVE 신문 생체공학
Investigation of Beige Fat Biology and Metabolism Using the CRISPR SunTag-p65-HSF1 Activation System
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Untersuchung der Biologie und des Stoffwechsels von beigefarbenem Fett mit dem CRISPR SunTag-p65-HSF1 Aktivierungssystem

DOI:
10.3791/64849-v

•

09:52 min

•

January 06, 2023

•

, ,
1Obesity and Comorbidities Research Center,State University of Campinas, 2Department of Structural and Functional Biology, Institute of Biology,State University of Campinas

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:53Molecular Cloning
  • 04:34In Vivo Injection of Adeno-Associated Virus (AAV) into the Inguinal White Adipose Tissue (iWAT)
  • 06:14In Vitro Differentiation of Stromal Vascular Cells (SVFs) into Beige Adipocytes
  • 07:23In Vitro AAV Infection of SVFs
  • 08:11Results: SPH-Induced Expression of Endogenous Prdm16 for Enhanced Oxygen Consumption
  • 09:23Conclusion

Summary

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Dieses Protokoll stellt die Verwendung von CRISPR SunTag-p65-HSF1 (SPH) in Adipozyten (AdipoSPH) als alternative Strategie zum Adeno-assoziierten Virus (AAV) zur Untersuchung der Biologie von beigem Fett dar. Die In-vivo-Injektion von AAV-tragender sgRNA, die auf das endogene Prdm16-Gen abzielt, reicht aus, um die Entwicklung von beigem Fett zu induzieren und das thermogene Genprogramm zu verbessern.

Tags

Keywords: CRISPRSunTagP65-HSF1Activation SystemAdipocytesGain-of-functionAdeno-associated VirusPRDM16SgRNACloningVirus Production

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