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CRISPR SunTag-p65-HSF1活性化系を用いたベージュ脂肪の生態と代謝の検討
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JoVE 신문 생체공학
Investigation of Beige Fat Biology and Metabolism Using the CRISPR SunTag-p65-HSF1 Activation System
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CRISPR SunTag-p65-HSF1活性化系を用いたベージュ脂肪の生態と代謝の検討

DOI:
10.3791/64849-v

•

09:52 min

•

January 06, 2023

•

, ,
1Obesity and Comorbidities Research Center,State University of Campinas, 2Department of Structural and Functional Biology, Institute of Biology,State University of Campinas

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:53Molecular Cloning
  • 04:34In Vivo Injection of Adeno-Associated Virus (AAV) into the Inguinal White Adipose Tissue (iWAT)
  • 06:14In Vitro Differentiation of Stromal Vascular Cells (SVFs) into Beige Adipocytes
  • 07:23In Vitro AAV Infection of SVFs
  • 08:11Results: SPH-Induced Expression of Endogenous Prdm16 for Enhanced Oxygen Consumption
  • 09:23Conclusion

Summary

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このプロトコルは、ベージュ脂肪生物学を調査するためのアデノ随伴ウイルス(AAV)の代替戦略として、脂肪細胞(AdipoSPH)におけるCRISPR SunTag-p65-HSF1(SPH)の使用を示しています。内因性Prdm16遺伝子を標的とするAAV担持sgRNAの インビボ 注射は、ベージュ脂肪の発生を誘導し、熱発生遺伝子プログラムを増強するのに十分である。

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Keywords: CRISPRSunTagP65-HSF1Activation SystemAdipocytesGain-of-functionAdeno-associated VirusPRDM16SgRNACloningVirus Production

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