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लघु बायोटिनीलेटेड आरएनए का उपयोग करके आरएनए-बाइंडिंग प्रोटीन का एक अनुकूलित मात्रात्मक पुल-डाउन विश्लेषण
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
An Optimized Quantitative Pull-Down Analysis of RNA-Binding Proteins Using Short Biotinylated RNA
DOI:

07:55 min

February 17, 2023

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:42Total Protein Harvest and Protein Concentration Determination
  • 01:48Bead Preparation
  • 03:12Bead Loading and Protein Binding on Beads
  • 04:13Washing of Nonspecific Binders
  • 04:53Elution of Specific Binders
  • 05:39Results: Quantification and Validation of Protein Interactors of Specific RNA Sequences
  • 07:24Conclusion

Summary

자동 번역

यहां, हम मानव कोशिकाओं से कुल प्रोटीन अर्क, बायोटिनीलेटेड आरएनए के साथ लेपित स्ट्रेप्टाविडिन मोती, और मास स्पेक्ट्रोमेट्री विश्लेषण का उपयोग करके विशिष्ट आरएनए अनुक्रमों के प्रोटीन इंटरएक्टर्स को उजागर करने, मात्रा निर्धारित करने और मान्य करने के लिए एक अनुकूलित इन विट्रो विधि प्रस्तुत करते हैं।

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