Isolating Bronchial Epithelial Cells from Resected Lung Tissue for Biobanking and Establishing Well-Differentiated Air-Liquid Interface Cultures

Dennis K. Ninaber; Anne M. van der Does; Pieter S. Hiemstra

doi:10.3791/65102

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Isolando Células Epiteliais Brônquicas de Tecido Pulmonar Ressecado para Biobanco e Estabelecendo Culturas de Interface Ar-Líquido Bem Diferenciadas

JoVE 신문
면역학 및 감염병학

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Isolating Bronchial Epithelial Cells from Resected Lung Tissue for Biobanking and Establishing Well-Differentiated Air-Liquid Interface Cultures

Isolando Células Epiteliais Brônquicas de Tecido Pulmonar Ressecado para Biobanco e Estabelecendo Culturas de Interface Ar-Líquido Bem Diferenciadas

DOI:

10.3791/65102-v

•

08:42 min

•

May 26, 2023

•

Dennis K. Ninaber, Anne M. van der Does, Pieter S. Hiemstra

¹PulmoScience Laboratory, Department of Pulmonology,Leiden University Medical Center

Chapters

00:04Introduction
00:47Isolation of Bronchial Epithelial Cells from Human Lung Tissue
02:17Cryopreservation of Human Primary Bronchial Epithelial Cells (PBECs)
03:28Thawing Cryopreserved PBECs and Growing Them for Culture on Inserts
04:23Establishing an Air‐Liquid Interface Culture with Primary Bronchial Epithelial Cells (ALI‐PBEC)
06:03Results: Characterization of ALI Cultures Using Cell‐Specific Marker Genes
07:41Conclusion

Summary

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Apresentamos aqui um método reprodutível, acessível e robusto para o isolamento e expansão de células epiteliais brônquicas primárias para biobanco de longo prazo e geração de células epiteliais diferenciadas por cultura na interface ar-líquido.

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