Denne protokollen beskriver anrikningen av native mykobakterielle ekstracellulære vesikler (mEVs) fra akseniske kulturer av Mycobacterium smegmatis (Msm) og hvordan mCherry (en rød fluorescerende reporter) som inneholder rekombinante MsmEVs kan utformes og berikes. Til slutt verifiserer den den nye tilnærmingen med anrikning av MsmEVs som inneholder EsxA-proteinet av Mycobacterium tuberculosis.