FACS 분리 마우스 위성 세포의 CUT&RUN 분석을 위한 효율적인 프로토콜

20년 이상 동안 우리 연구실은 핵 수용체의 병태생리학적 역할에 관심을 가지고 있습니다. 생체 내 기능을 해독하기 위해 우리는 발현의 공간적, 시간적 제어를 허용하는 마우스 모델을 설계했습니다. 이와 동시에 쥐 조직에서 분자 기능을 조사하는 최첨단 기술을 개발했습니다.

우리의 과학적인 관심은 최근 골격근을 포함한 다양한 조직에서 세코스테로이드 및 스테로이드 수용체 신호 전달을 결정하도록 이끌었습니다. 우리는 최근에 골격근의 세포를 분화하는 근섬유의 안드로겐 수용체가 수축 및 대사 기능에 중요한 역할을 한다는 것을 입증했습니다. 우리의 최근 발견은 근육 관련 장애에 대한 효과적인 치료법을 개발하는 데 중요한 골격근 병태생리학적 역학에 대한 더 깊은 이해를 제공합니다.

우리는 생체 내에서 근육 줄기 세포에 대한 시스트롬 분석을 수행할 수 있도록 이 프로토콜을 개발했습니다. 이전의 모든 프로토콜은 시험관 내 모달을 사용하여 전체 유기체 맥락에서 조사를 완전히 분리합니다. 이 프로토콜은 저렴하고 시간 효율적일 뿐만 아니라 골격근 전구 세포에서 전사 인자 모집 및 염색질 환경을 연구하기 위한 효과적인 실험 환경을 제공합니다.

이 프로토콜로 준비된 크로마틴은 위성 세포에서 AR 시스트롬의 첫 번째 게놈 전체 분석을 제공했으며 유전자 조절에 대한 향후 연구를 용이하게 할 것입니다. 많은 것들 중에서, 우리의 미래 목표는 이러한 연구를 다른 옥소스테로이드 수용체로 확장하고 골격근의 재생 과정에 관여하는 다양한 세포 유형에서 특정 공동 조절자를 탐구하는 것입니다.