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Edición del genoma CRISPR-Cas9 de embriones de rata mediante virus adenoasociados (AAV) y electroporación de embriones de 2 células
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JoVE 신문 유전학
CRISPR-Cas9 Genome Editing of Rat Embryos using Adeno-Associated Virus (AAV) and 2-Cell Embryo Electroporation
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Edición del genoma CRISPR-Cas9 de embriones de rata mediante virus adenoasociados (AAV) y electroporación de embriones de 2 células

DOI:
10.3791/66069-v

•

08:24 min

•

March 15, 2024

•

, , , , ,
1Animal Modeling Core,University of Missouri, 2Comparative Medicine Program,University of Missouri, 3Rat Resource and Research Center,University of Missouri, 4Department of Veterinary Pathobiology,University of Missouri

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:13AAV-mediated DNA repair template delivery
  • 02:54Electroporation preparation
  • 03:432-cell embryo electroporation
  • 06:19Representative results
  • 07:48Conclusion

Summary

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Este protocolo presenta un enfoque optimizado para la producción de modelos de ratas modificadas genéticamente. El virus adenoasociado (AAV) se utiliza para administrar una plantilla de reparación de ADN, y la electroporación se utiliza para administrar reactivos CRISPR-Cas9 para completar el proceso de edición del genoma en un embrión de 2 células.

Tags

CRISPR-Cas9Genome EditingRat EmbryosAdeno-associated Virus (AAV)2-cell Embryo ElectroporationHomology Directed RepairKnock-in Rat ModelsDNA Repair TemplateDNA InsertionDNA SubstitutionViral TransductionCRISPR RNP ComplexesElectroporation

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