Imaging in vivo di sferoidi epatici trapiantati nella camera anteriore dell'occhio del topo
March 29th, 2024
Qui, descriviamo una piattaforma che consente l'imaging non invasivo in vivo di sferoidi epatici innestati nella camera anteriore dell'occhio del topo. Il flusso di lavoro spazia dalla generazione di sferoidi da cellule epatiche primarie al trapianto nell'occhio di topo e all'imaging in vivo a risoluzione cellulare mediante microscopia confocale.
Nel nostro gruppo, utilizziamo la camera anteriore dell'occhio del topo come sito di trapianto per l'imaging in vivo e non invasivo di steroidi epatici. Questa piattaforma di imaging di nuova costituzione fornirà uno strumento unico per i ricercatori e amplierà la nostra comprensione della fisiologia e della patologia del fegato sia nella ricerca di base che in quella preclinica. Nella ricerca biomedica, ci affidiamo alla visualizzazione dei processi cellulari per comprendere i meccanismi della malattia e il campo della ricerca epatica attualmente manca di metodi per l'imaging ad alta risoluzione in vivo in cui le cellule epatiche possono essere monitorate longitudinalmente nel tempo.
Rispetto all'imaging epatico intravitale, la nostra tecnica non è invasiva e le cellule epatiche possono essere visualizzate ripetutamente in numerose sessioni di imaging, consentendoci di monitorare la funzionalità epatica con risoluzione di singole cellule in risposta a diverse sfide. Con la nostra piattaforma, gli steroidi epatici sopravvivono nell'occhio per molti mesi e lo stesso topo ricevente può essere visualizzato in modo non invasivo nel tempo. Ciò consente una riduzione del numero di animali da esperimento che utilizziamo aumentando la qualità dei dati in vivo.
Negli ultimi dieci anni, il nostro gruppo ha sviluppato la piattaforma di imaging oculare per essere un potente strumento di ricerca. Inizialmente è stato progettato per l'imaging degli occhielli pancreatici, ma ora è stato adattato agli steroidi epatici e ha il potenziale per essere esteso ad altri organi e aree di ricerca.
Panoramica
Questo studio presenta una piattaforma di imaging non invasiva per gli sferoidi epatici impiantati nella camera anteriore dell'occhio del topo. L'approccio permette il monitoraggio longitudinale della funzione epatica a risoluzione di singola cellula.
Componenti Chiave dello Studio
Area di Scienza
- Neuroscienze
- Imaging Biomedica
- Fisiologia Epatica
Sfondo
- La ricerca epatica attuale manca di tecniche di imaging non invasive.
- L'imaging in vivo è cruciale per comprendere la fisiologia e la patologia del fegato.
- I metodi esistenti non permettono ripetuti imaging delle cellule epatiche nel tempo.
- La camera anteriore dell'occhio del topo serve come nuovo sito di trapianto.
Obiettivo dello Studio
- Sviluppare una piattaforma per l'imaging non invasivo degli sferoidi epatici.
- Monitorare longitudinalmente la funzione epatica in un singolo animale.
- Ridurre il numero di animali sperimentali utilizzati nella ricerca.
Metodi Utilizzati
- Preparazione di sferoidi epatici da cellule epatiche primarie.
- Trapianto di sferoidi nell'occhio del topo.
- Imaging in vivo utilizzando microscopia confocale.
- Monitoraggio degli sferoidi epatici per diversi mesi dopo il trapianto.
Risultati Principali
- Impianto di successo degli sferoidi epatici nell'occhio del topo.
- L'imaging longitudinale ha rivelato processi cellulari e presenza di vasi sanguigni.
- Ha dimostrato il potenziale per sessioni di imaging ripetute.
- Ha migliorato la comprensione della funzione epatica in risposta a varie sfide.
Conclusioni
- La piattaforma sviluppata è uno strumento potente per la ricerca epatica.
- Permette l'imaging non invasivo ad alta risoluzione delle cellule epatiche.
- La tecnica può potenzialmente essere adattata per altri organi.
