Polymerase Chain Reaction and Dot-Blot Hybridization for <i>Leptospira</i> Detection in Water Samples

Eduardo Delgadillo-Tellez; Beatriz Zavaleta-Villa; Daniel Atilano-L&#243;pez; Rigoberto Hern&#225;ndez-Castro; Ang&#233;lica Olivo-D&#237;az; Erika Margarita Carrillo-Casas

doi:10.3791/65435

Dot-Blot Assay for Detection of Leptospira DNA in Water Samples

June 14, 2024

Polymerasekædereaktion og dot-blot-hybridisering til detektion af leptospira i vandprøver

00:32 min

•

Amplifikation af Leptospira DNA og dets overførsel på membranen ved hjælp af et dot-blot-apparat

01:53 min

•

DNA-membranfiksering og sondehybridisering til detektion af leptospira i vandprøver

01:29 min

•

Visualisering af DNA-hybriderne ved hjælp af kemiluminescens til detektion af leptospira i vandprøver

02:15 min

•

Eduardo Delgadillo-Tellez, Beatriz Zavaleta-Villa, Daniel Atilano-López, Rigoberto Hernández-Castro, Angélica Olivo-Díaz, Erika Margarita Carrillo-Casas

¹Department of Molecular Biology and Histocompatibility,General Hospital “Dr. Manuel Gea González”, ²Diagnostic Laboratory-Bacteriology, Leptospira Section, Department of Microbiology and Immunology, Veterinary Medicine Faculty,UNAM, ³Department of Ecology of Pathogens,General Hospital “Dr. Manuel Gea González”

Summary

I denne undersøgelse blev en dot-blot-applikation designet til at detektere Leptospira fra de tre hovedklader i vandprøver. Denne metode gør det muligt at identificere minimale DNA-mængder, der specifikt er målrettet mod en digoxigenin-mærket sonde, der let detekteres af et anti-digoxigenin-antistof. Denne tilgang er et værdifuldt og tilfredsstillende redskab til screeningsformål.