Back to chapter

5.2:

Genetik bir Şablon olarak DNA

JoVE Core
Biologia Molecular
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Core Biologia Molecular
DNA as a Genetic Template

Idiomas

COMPARTILHAR

1953’te önerilen Watson-Crick modeli, DNA molekülünün, kalıtım için bir temel oluşturan iki yapısal özelliğini açıklığa kavuşturdu. Bu model, DNA’nın, bir sağ-elli sarmal oluşturmak için birbirinin etrafında dönen iki nükleotid dizisinden oluştuğunu öne sürmektedir. Bu zincirler doğası gereği antiparaleldir, yani bir zincirin 3 üssü ucu diğer zincirin 5 üssü ucuna bakar.Her DNA zinciri, eş zincirinin tam olarak tamamlayıcısı olan bir nükleotid dizisi içerir;bu da, her zincirin, eşi için bir şablon görevi görmesini sağlar. Böylece bir hücre bölünmeden önce, iki DNA zincirini ayırarak ve birbirinin tam olarak tamamlayıcısı olan iki yeni DNA zinciri üreterek DNA’sını kopyalayabilir Ek olarak Watson-Crick modeli, baz eşleşmesinin bir pürin ile bir pirimidin arasında gerçekleştiğini öne sürmektedir. Adenin, guanin, sitozin ve timin dört harfli nükleotid alfabesini oluşturur.Günümüzde bu nükleotid harfleri, translasyon sırasında üç harfli bir kodona dizildiğinde, bir alfabedeki harflerin dizilerek kelimeleri oluşturmasına çok benzer şekilde, 20 amino asitten birinin kodlandığını biliyoruz. Bu amino asit kelimeleri bağlanarak cümleleri, yani farklı proteinlere katlanan zincirleri oluşturur. Farklı kelime ve cümle kombinasyonlarının farklı kitaplar olarak sonuçlanması gibi, farklı kodon permütasyonları farklı genleri sonuç verir.Genom, bir organizmanın genlerinde yer alan bilgilerin bütünüdür ve bir organizmanın yaşamı boyunca üreteceği tüm RNA moleküllerini ve proteinleri kapsar. Genomlar arasındaki farklılıklar, genotipik ve fenotipik olarak farklı organizmalar ve türlerle sonuçlanır.

5.2:

Genetik bir Şablon olarak DNA

DNA molekülünün iki yapısal özelliği kalıtım mekanizmaları için bir temel sağlar: dört nükleotid baz ve çift sarmallı doğası. 1952'de önerilen çift sarmallı DNA yapısı içeren Watson-Crick modeli, büyük ölçüde araştırmacı Rosalind Franklin ve Maurice Wilkins'in X-ışını kristalografisi çalışmalarına dayanıyordu. Watson, Crick ve Wilkins, 1962'de çalışmaları için Nobel Fizyoloji veya Tıp Ödülünü aldılar. Franklin, tartışmalı olarak, hala tartışılan nedenlerden dolayı ödülden çıkarıldı.

Watson-Crick DNA modeli, çok basit bir şekilde, DNA'nın sağ el modelinde bir sarmal oluşturmak için birbiri etrafında dönen iki nükleotid ipliğinden oluştuğunu ve nükleotid eşleşmesinin bir pürin ve bir pirimidin arasında gerçekleştiğini öne sürdü.

İki DNA ipliği antiparaleldir, yani bir ipliğin 3' ucu diğerinin 5' ucuna bakar. Bu, her bir iplikçiğin DNA replikasyonu sırasında partneri için bir şablon görevi görmesine ve birbirini tam olarak tamamlayan iki yeni DNA ipliği üretmesine izin verir. Bununla birlikte, DNA replikasyonunun bu şekilde gerçekleşip gerçekleşmediği açık değildi.

Meselson ve Stahl Deneyi

Meselson ve Stahl, ağır bir Azot15 izotopu içeren bir ortamda birkaç nesil boyunca E. coli çoğalttılar. Zamanla ağır azot azotlu nükleotid bazlarına ve dolayısıyla DNA'ya dahil edildi. Bundan sonra E. coli farklı bir azot izotopu 14N içeren bir ortama yerleştirildi ve birkaç nesil daha yetiştirildi. Her jenerasyondan sonra bazı hücrelerden bir DNA örneği izole edildi bir gradyana yüklendi ve yüksek hızlarda santrifüjlendi. Bir gradyanda DNA yüzer yoğunluğuna (yani DNA'nın yüzeceği Gradyan içindeki yoğunluk) göre ayrıldı.

15N ortamında santrifüj tüpünün alt kısmında tek bir yüksek yoğunluklu bant gözlendi. Bakteriler "daha hafif" ortama aktarıldıktan hemen sonra bu tek bant sütunda yukarı doğru kaymış ve daha düşük bir yoğunluğa işaret etmiştir. Bununla birlikte sonraki nesiller iki bantla sonuçlandı: biri 14N yoğunluğuna karşılık gelirken ve diğeri bir ara konumda yerleşti. Bu sonuç yalnızca yarı korumalı bir çoğaltma modu ile açıklanabilir böylece Watson-Crick modeli doğrulanabilir.

Leitura Sugerida

  1. Watson, James D., and Francis HC Crick. "Molecular structure of nucleic acids." Nature 171.4356 (1953): 737-738.
  2. Meselson M, Stahl FW. THE REPLICATION OF DNA IN ESCHERICHIA COLI. Proc Natl Acad Sci U S A. 1958;44(7):671–682. doi:10.1073/pnas.44.7.671