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6.1:

Replicação em Procariontes

JoVE Core
Biologia Molecular
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JoVE Core Biologia Molecular
Replication in Prokaryotes

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Em procariotas, a replicação de DNA começa quando proteínas iniciadoras se vinculam para dar origem à replicação, uma pequena região de DNA contendo uma sequência específica de bases, criando um complexo. Este complexo ajuda a inicialmente, separar o DNA. Então, a enzima DNA helicase liga-se a ela E continua a desenrolar o DNA quebrando as ligações da cadeia de hidrogénio entre as cadeias complementares.As áreas recém-abertas são estabilizadas por proteínas de ligação de DNA de fita simples Cada um pode agora servir como modelo Para a síntese de uma nova cadeia de DNA. O desenrolar e a síntese prossegue em ambas as direções a partir da origem, criando duas bifurcações de replicação. À frente dos garfos, enzimas toposisomerases se ligam ao DNA e reduzem a tensão de torção conforme a molécula se desenrola.Uma vez separadas as cadeias, outra enzima, primasse, sintetiza um RNA primário, uma pequena extensão de RNA complementar à sequência de DNA. O primário proporciona um lugar para a enzima DNA polimerase adicionar nucleótidos complementares à sequência de DNA, criando uma nova cadeia de DNA em um processo 01:23.700 01:25.393 chamado alongamento. O DNA polimerase sintetiza DNA nos cinco primeiros em três direções principais da molécula.Assim, a síntese desta cadeia, a primeira cadeia, prossegue continuamente. A outra cadeia, a cadeia de atraso, tem a orientação oposta. Consequentemente, o DNA é sintetizado em pedaços curtos chamados fragmentos de Okazaki, alongados a partir de RNA primários adicionais, para trás da direção geral do movimento do garfo de replicação.02:01.770 02:04.020 Os RNA primários são então excisados por enzimas como a RNAse, substituídas por DNA, e os fragmentos de DNA são unidos pela enzima DNA ligase, criando uma cadeia contínua. A replicação do DNA prossegue por toda a molécula, resultando em duas moléculas circulares de DNA. Isto é considerado um processo semiconservativo porque cada molécula contém uma cadeia antiga e uma nova cadeia.

6.1:

Replicação em Procariontes

Visão Geral

A replicação do DNA tem três passos principais: iniciação, alongamento e término. A replicação em procariotas começa quando as proteínas iniciadoras se ligam à única origem da replicação (ori) no cromossoma circular da célula. A replicação prossegue então em torno de todo o círculo do cromossoma em cada direção a partir de dois garfos de replicação, resultando em duas moléculas de DNA.

Muitas Proteínas Trabalham Juntas Para Replicar o Cromossoma

A replicação é coordenada e realizada por uma série de proteínas especializadas. A topoisomerase quebra um lado do esqueleto de açúcar-fosfato da cadeia dupla do DNA, permitindo que a hélice do DNA se desenrole mais rapidamente, enquanto que a helicase quebra as ligações entre pares de bases no garfo, separando o DNA em duas cadeias molde. Proteínas que se ligam a moléculas de DNA de cadeia simples estabilizam as cadeias à medida que o garfo de replicação viaja ao longo do cromossoma. O DNA só pode ser sintetizado na direção de 5’ a 3’, pelo que uma cadeia do molde—a cadeia contínua—é alongada continuamente, enquanto que a outra cadeia—a cadeia descontínua—é sintetizada em porções mais curtas de 1000-2000 pares de bases chamados fragmentos de Okazaki.

Múltiplas Polimerases Participam do Alongamento

Grande parte da investigação para perceber a replicação do DNA procariótico foi realizada na bactéria Escherichia coli, um organismo modelo comumente usado. E. coli tem 5 DNA polimerases: Pol I, II, III, IV e V. A Pol III é responsável pela maior parte da replicação do DNA. Pode polimerizar cerca de 1.000 pares de bases por segundo. Esse ritmo surpreendente permite que a maquinaria presente nos dois garfos de replicação dupliquem o cromossoma de E. coli—4,6 milhões de pares de bases—em aproximadamente 40 minutos. A DNA polimerase I também é bem caracterizada; o seu papel principal é remover os primers de RNA do início dos fragmentos de Okazaki na cadeia descontínua.

Quando a Divisão Supera a Duplicação

Em condições favoráveis de crescimento, E. coli divide-se a cada 20 minutos, cerca de metade do tempo que leva para replicar o seu genoma. Como é isso possível quando ambas as células filhas devem ter o seu próprio DNA? Os cientistas descobriram que as bactérias podem iniciar outra ronda de replicação de DNA a partir da origem da replicação antes da primeira ronda estar concluída; isso significa que as células filhas recebem um cromossoma que já está em processo de ser copiado e estão preparadas para se dividirem novamente muito rapidamente.