Back to chapter

10.4:

Transkripsiyon Regülatörlerinin Kooperatif Bağlanması

JoVE Core
Biologia Molecular
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Core Biologia Molecular
Cooperative Binding of Transcription Regulators

Idiomas

COMPARTILHAR

Transkripsiyon regülatörleri, eşyanlı-düzenleyici diziler olarak bilinen kısa DNA dizilerini tanıyan ve bunlara bağlanan proteinlerdir. Bu diziler genellikle 10 nükleotidden daha kısa olduğundan, genomda aynı dizinin rastgele oluşma ihtimali çok yüksektir. Birçok regülatör, rastgele dizilere bağlanmayı sınırlandırmak için bir dimer çifti oluşturur.Bir dimer, 10 nükleotidden daha uzun dizileri bağlayabilir;bu da dizinin genomda rasgele bulunma olasılığını azaltır ve bağlanma özgüllüğünü artırır. Bu düzenleyici dimerler, aynı tip monomerden yapılmış bir homodimer veya farklı tipte monomerlere sahip bir heterodimer olabilir. Çiftler farklı monomerlerden oluşabildiğinden, çeşitli kombinasyonları, yeni protein tiplerine ihtiyaç duymadan farklı dizilere bağlanmaya izin verir.Ortaklaşa düzenleyiciler, DNA’ya bağlı olmadıklarında;bazen zayıf ve kovalent olmayan etkileşimler yoluyla dimerler oluşturabilen monomerler olarak bulunurlar. Bununla birlikte, bu yapılar, DNA’ya bağlandıklarında ortaklaşa bağlanma nedeniyle sıkı bağlı dimerler oluşturur. Ortaklaşa bağlanma, yapısal değişiklikler nedeniyle, bir monomerin eşyanlı-düzenleyici diziye bağlanmasının, ikinci bir düzenleyici bağlanma olasılığını artırması durumudur.Bu, bağlanma yerinin diğer tarafına ikinci bir düzenleyicinin sıkıca bağlanmasına ve birincisi ile bir dimer oluşturmasına izin verir. Bu, çoğu zaman, eşyanlı-düzenleyici dizilerin her birinin tüm örneklerinin bağlanmış bir düzenleyiciye sahip olduğu veya hiçbirinin sahip olmadığı anlamına gelir. Birçok gende DNA, histon proteinlerinin etrafına sıkıca sarılarak, transkripsiyon düzenleyicilerinin eşyanlı-düzenleyici dizilere erişmesini engeller.Bununla birlikte, DNA’nın gevşek bir şekilde bağlanmış ucu, bağlanma için biraz alan sağlar. Bu bölgeye tek bir düzenleyicinin bağlanması, yapının sarımının açılmasına yardım eder ve böylece diğer düzenleyicilerin bağlanmasına olanak sağlar.

10.4:

Transkripsiyon Regülatörlerinin Kooperatif Bağlanması

Transkripsiyonel düzenleyiciler, gen transkripsiyonunu düzenlemek için DNA'daki spesifik Cis-Düzenleyici dizilere bağlanır. Bu Cis-Düzenleyici diziler çok kısadır, genellikle on nükleotid çiftinden daha azdır. Kısa uzunluk, genom boyunca rastgele meydana gelen aynı dizinin yüksek bir olasılığı olduğu anlamına gelir.  Düzenleyiciler de benzer dizilerin gruplarına bağlanabilir beri, bu daha da rastgele bağlanma şansını artırır. Transkripsiyonel regülatörler, bir monomerin bağlanmasından iki kat daha uzun bir diziye bağlanan, dizileri arttıran ve rastgele bağlanma şansını azaltan dimerler oluşturur. Transkripsiyon regülatörü dimerleri homodimerler veya heterodimerler olabilir. Çözümde, bu işbirlikçi düzenleyiciler ya monomerler ya da zayıf bağlantılı dimerler olarak mevcuttur. Bununla birlikte, bu monomerler DNA üzerinde genişletilmiş bir Cis-Düzenleyici diziye bağlandığında, kararlı dimerler oluştururlar.

İşbirliği, monomerik bir proteinin bağlanmasının DNA'da yapısal değişikliklere neden olduğu ve düzenleyici bölgeleri arttırdığı bir olgudur (diğer monomerler için afinite). Bu, monomerlerin Cis-Düzenleyici dizisinde dimerler olarak bağlanmasını sağlar.  Bu fenomen aynı zamanda düzenleyicilerin nükleozomdaki histon proteinlerine sıkı sıkıya bağlı olan DNA üzerinde bulunan bölgelere erişmelerine yardımcı olur, aksi takdirde erişilemez. İlk bağlanma genellikle nükleozomun sonunda DNA'da meydana gelir ve burada sıkıca bağlanmaz. Bu bölgedeki bağlanma, DNA'nın histonlardan uzaklaşmasına ve böylece nükleozomun açılmasına yol açar. Bu paket açma, diğer düzenleyici sitelere erişimi artırır. Ökaryotlarda, transkripsiyon faktörünün bağlanması esas olarak işbirliğine bağlıdır. İşbirliği bazı durumlarda ortaya çıkabiliyor olmasına rağmen, prokaryotlarda transkripsiyonel düzenleyicilerin bağlanmalarının çoğu işbirliği ile değildir. Bu gibi durumlarda, regülatörler birkaç kovalent olmayan etkileşimle bir arada tutulan kararlı dimerler olarak bulunur.

Bilinmeyen bir regülatörün işbirliği içinde mi yoksa işbirliği içinde mi bağlandığı, DNA üzerindeki işgal edilen bağlanma bölgelerinin sayısını protein konsantrasyonuna göre çizerek belirlenebilir. Eğri S şeklinde bir eğri ise, regülatörün bağlanma bölgelerine işbirliği içinde bağlandığını gösterir. Eğri, işgal edilen tüm bağlanma bölgelerine yaklaştıkça tesviye edilmeden önce sabit bir şekilde yükselirse, bağlamanın işbirliği ile olmadığını gösterir.

Leitura Sugerida

  1. Alberts et al., 6th edition; pages 375, 378-380
  2. Morgunova, E., & Taipale, J. (2017). Structural perspective of cooperative transcription factor binding. Current opinion in structural biology, 47, 1-8.