Sinir indüksiyon beyin oluşumunda ilk adımdır. Hensen düğüm (düzenleyen), sinir kaderi kabul komşu doku talimatını hangi bir mekanizma, yani sinir sistemi yol açmaları. Bu video civciv embriyo sinir indüksiyonu için bir test göstermektedir.
Civciv embriyo erken embriyonik gelişim çalışmaya değerli bir araçtır. Şeffaflık, erişilebilirlik ve manipülasyon kolaylığı, sinir sisteminin oluşumu ve ilk desenlendirme çalışmak için ideal bir araçtır. Bu video bir konak içine greft düzenleyen doku Hensen s düğümü (civciv embriyo düzenleyen) bir yöntem olan bir ana yetkili ektoderm aşılı nasıl gösteriyor. Organizatörü greft dokusu, sinir indükleyici sinyalleri aracılığıyla bir sinir kaderi kabul ettik na örten bildirir. Bu mekanizma nöral indüksiyon olarak adlandırılır ve amniotları beyin ve omurilik oluşumunda ilk adım teşkil etmektedir. Bu yöntem aslında piliç varsayılan sinir indükleyici moleküllerin karakterizasyonu için kullanılır. Bu video tayininde sinir indüksiyonu için farklı adımları gösteriyor; İlk olarak, donnor embriyo eksplante ve bir çanak üzerine tutturulmuş. Sonra, ev sahibi embriyo Yeni kültür için hazırlanmıştır. Greft eksize ve ev sahibi pellusida marjı nakledilen. Ev sahibi 18-22 saat kültüre. Montaj sabit ve başka uygulamalar (örneğin in situ hibridizasyon) işlenir. Bu yöntem başlangıçta Waddington icat edildi<sup> 1,2</sup> Ve Gallera<sup> 3,4</sup>.
Bu video nöral indüksiyonu için bir test farklı adımları gösteriyor; Bu testte aslında piliç varsayılan sinir indükleyici moleküllerin karakterizasyonu için kullanılır ve böylece embriyolojik micromanipulations 1-4 arasında değişen çok çeşitli uygulamalar için kullanılabilir; 6 çözülüyor yeni sinyalizasyon kaskadlar 7,8, beyin oluşumu ve sinir sisteminin geri kalan ilk adım anlayışı hedefliyor.
DP Uyuşturucu İstismarı Ulusal Enstitüsü Ruth Kirschstein Ödülü 1F32 DA021977-01A1 alıcı. Bu çalışma, Margaret M. RHF Alkek Vakfı tarafından desteklenmiştir.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Eggs | Animal | Charles River Laboratories | Premium Fertile | Fertilized, HH3+ (14 hr) |
Stereomicroscope | Microscope | Leica Microsystems | MZ9.5 or similar | |
Hybridization Incubator | Equipment | Robbins Scientific | M1000 | Use with inverted Pyrex dish and 500 ml ddH2O beaker |
Marsh Automatic Incubator | Equipment | Lyon | RX | |
Pyrex dish | ||||
Watchmaker’s glass 50mm | Tool | VWR | 66112-060 | |
Glass rings | Tool | Physical Plant facility | cut 4 mm thick sections of glass tubing (27 mm outer diam, 25 mm inner diam). Do not fine polish. | |
Curved Forceps (1) | Tool | Electron Microscopy Sciences | 72991-4C | |
Forceps (2) | Tool | Fine Science Tools | 11002-13 | blunt ended using sharpening Stone and 100ul mineral oil |
Fine scissors | Tool | Fine Science Tools | 14161-10 | |
Plastic dishes | Tool | Falcon | 353001 | |
Rubber Bulb | Tool | Electron Microscopy Sciences | 70980 | |
DiI | Reagent | Invitrogen | D-282 | |
Aspirator tube assembly | Tool | Sigma | A5177-5EA | |
Microelectrode puller | Equipment | Sutter Instruments | Sutter Instruments P-97 Flaming/Brown Micropipette | |
Pasteur Capillary Pipette | Tool | Electron Microscopy Sciences | 70950-12 | round edge under flame |
Culture chamber | Tool | Pioneer Plastics | 030C | |
Microcapillary tube | Tool | Sigma | P1049-1PAK | |
Microdissecting knife | Tool | Fine Science Tools | 10056-12 | Use to puncture cavities prior to in situ hybridization |
Minuten pins 0.2mm diam | Tool | Fine Science Tools | 26002-20 | Mix 1 part Curing Agent, 9 parts Base; set O/N at 37C |
Diethylpyrocarbonate (depc) | Reagent | Electron Microscopy Sciences | 15710 | |
Sylgard 184 Silicon Elastomer Curing Agent and Base | Dow Corning | 0001986475 | Mix 1 part Curing Agent, 9 parts Base; set O/N at 37C | |
Diethylpyrocarbonate (depc) | Acros Organics | 10025025 | Add 1ml depc to 1l PBS; shake; autoclave | |
16% PFA | Electron Microscopy Sciences | 15710 |