Хирургическая процедура для индукции односторонних ишемии задних конечностей свидетельствует, с подтверждением ишемии лазерным перфузии Доплера.
В Соединенных Штатах, заболевания периферических артериальных (PAD) страдают около 10 миллионов человек, а также распространение по всему миру. Медицинские терапии для облегчения симптомов ограничены. Хирургическое или эндоваскулярных вмешательств являются полезными для некоторых людей, но и долгосрочные результаты часто разочаровывают. В результате, существует необходимость разработки новых методов лечения для лечения PAD. Мышиные подготовки ишемии задних конечностей представляет собой модель PAD, и полезно для тестирования новых методов лечения. По сравнению с другими моделями ишемии тканей, таких как ишемическая или мозговой артерии перевязки, перевязки бедренной артерии обеспечивает простую модель ишемической ткани. Другие преимущества этой модели легкость доступа к бедренной артерии и низкой смертности.
В этом видео, мы демонстрируем методологии мышиной модели односторонних ишемии hindimb. Конкретные материалы и процедуры создания и оценки модели будет описана, в том числе оценку перфузии конечностей при лазерной допплеровской визуализации. Этот протокол также может быть использована для трансплантации и неинвазивные отслеживания клеток, о чем свидетельствует Huang и соавт. 1.
Есть несколько источников изменчивости, чтобы рассмотреть при планировании и проведении задних конечностей модели ишемии. Во-первых, уровень ишемии может различаться в зависимости от расположения лигирования в отношении этой боковых ветвей. Таким образом, для последовательности модели, животные должны пройти тот же уровень артериального труб. Другой источник изменчивости при ишемической восстановление, связанные с возрастом животных, с маленькими животными (6-8 недель), имеющие более быстрого и полного восстановления темпами, чем старых животных (8-10 месяцев), по оценке гемодинамики (т.е. лазерного доплеровского перфузии) или функциональные (например, тестирование беговой дорожке) мер. Для исследований, в которых один является оценка ангиогенных агентом, он может быть предпочтительнее использовать старых животных, потому что большая разница между группами могут наблюдаться с терапевтического вмешательства. Наоборот, для исследований, в которых один является оценка антиангиогенного фактор, он может быть предпочтительнее использовать более молодых животных, чтобы максимизировать эффект 3 размера.
Если выполнены правильно, там должны быть минимальными осложнениями, такими как кровотечение, инфекция, или смертности. Если кровотечение происходит путем случайного нарушения бедренную вену или других судов, умеренное давление со стерильным ватным тампоном наконечником аппликатором или марлю следует наносить на месте кровоизлияния, пока кровотечение не остановится. Животные демонстрируют признаки инфекции следует лечить антибактериальными агентами. Животные, демонстрирующие значительные гангрена, возможно, потребуется beeuthanized. Это осложнение чаще встречается у взрослых животных, а в некоторых штаммов, например, с мышей BALB 4. Кроме того, модель задних конечностей ишемии может привести к легкой или умеренной боли. Таким образом, анальгетики, такие как бупренорфин или carprofen следует вводить по мере необходимости для лечения боли, в соответствии с рекомендациями IACUC.
В заключение, мы продемонстрировали простой и воспроизводимый метод для изучения ОРП в мышиной модели задних конечностей ишемии. Модели ишемии задней конечности с лазерным анализ допплер является отличной системой для изучения сосудистой патологии, а также для оценки терапевтических кандидатов.
Авторы выражают благодарность Андреа Акстелл, Сатоши Ито, доктор медицинских наук, Джефф Velotta, доктор медицинских наук, Грант Хойт, Роберт С. Роббинс, доктор медицинских наук, Цзинь Юй, доктор медицинских наук, Тим Дойл, кандидат наук, и Стэнфордского небольшое ядро изображениями животных для оказания технической помощи. Авторы также выражают благодарность А. М. Бикфорд, Inc для поддержки ветеринарное оборудование. Это исследование было поддержано исследовательских грантов от Национального института здоровья (R01 HL-75774, R01 CA098303, R21 HL085743, 1K12 HL087746), Табак Калифорнии соответствующей программы исследований Заболевание Калифорнийского университета (15IT-0257 и 1514RT-0169) , и Калифорнийского института регенеративной медицины (RS1-00183). NH поддерживает общение с Американской ассоциации сердца.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Surgical Tools | Tool | Fine Science Tools | ||
Constix Cotton Swabs | Tool | Contec | SC-4 | |
Betadine (Povidone-iodine) | Reagent | PDI | ||
70% alcohol | Reagent | Kendall | ||
Phosphate Buffered Saline | Reagent | Invitrogen | ||
7-0 silk suture | Tool | Genzyme | ||
5-0 vicryl suture | Tool | Ethicon | ||
Electric shaver | Tool | GE | ||
Cautery | Tool | Baxter | ||
Laser Doppler and PeriScan PIM 3 System | Equipment | Perimed |