Summary

ラット心臓における培養組織の移植

Published: June 24, 2009
doi:

Summary

ここでは、房室(AV) – 溝大人ルイスラットので培養組織を移植する心臓外科手術を説明します。

Abstract

齧歯類の手術は、しばしば人工組織のユーティリティを評価する上で重要なコンポーネントです。外科的処置の多種多様な一般的な実験用ラットやマウスで行われ、これらはかなり頻繁にベンチトップの実験と大規模な動物試験やヒト試験の中間段階として機能することができます。げっ歯類は、足場の材料と細胞の新たな組み合わせをテストするために確立された、費用対効果の高い、そして生理的に適切なモデル系を提供することを考えると、彼らは心臓血管組織工学の研究に適し、特にです。現在、我々はラット心臓の房室(AV)溝に筋前駆細胞を含む培養組織を移植する心臓切開手術を説明します。これらのインプラントは、完全心ブロック[1]を有する小児患者において、従来のペースメーカー移植に代わる治療法を提供するという究極の目標と右心房と右心室の間の電気コンジットを作成することを意図している。培養組織は、開胸術によってAV -溝に注入される。私達の目的のためには、Lewisラットを麻酔し、侵襲的に無菌外科手術時の気道陽圧を維持するために換気されています。心臓へのアプローチは5で前部の外側を切開して右開胸で行われている<sup>目</sup>肋間スペース。組織構造は、単一の7から0 Proleneの縫合糸を用いてAV溝で固定し、心臓の腹部分で、右心室と心房の間に配置されている。心外膜は部分的にレシピエント心筋細胞や培養組織に含まれるそれらの間の直接接触を可能にするために削除されます。移植後、胸の壁が層に閉じている、あらゆる気胸が排気され、そして動物は抜管し、鎮痛剤で治療する。

Protocol

パート1:全身麻酔の導入 200〜250グラムのルイスラットは50 mg / kgのケタミンおよび腹腔内腔に30 Gの針を注射した4 mg / kgをキシラジンで麻酔です。上腹部と右胸を徹底的に70%エタノールとその後ポビドンヨード外用消毒液で洗浄髪と切開部位を除去するためにクリップされます。 動物は気管内小動物の呼吸(ハーバード大学の装置)に接続された16 G静脈内カテーテルを用いて?…

Discussion

外科手術に有利な結果の場合、それは適切に挿管し、侵襲的に動物を換気することが重要です。ラットは、単に鎮静と自発的に呼吸することが許可されている胸部がげっ歯類の一般的な胸膜のためにオープンされている間、両方の肺は、必然的に崩壊するだろう。胸を閉じる前に、任意の気胸は完全に除去し、肺は完全に無気肺を減らすために拡大する必要があります。そうでなければ、人?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

とボストン小児病院で心臓伝導基金への拠出、この作業は、研究の国立衛生研究所からの補助金(HL088206 HL068915)によってサポートされています。

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
7×4 Thermo Pad 4/box Equipment Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada MODEL 704R  
Inspira ASV Ventilator Equipment Harvard Apparatus, Holliston, MA 01746 USA    
Handheld Pulse Oximeter Equipment Nellcor, Boulder, CO 80301 USA N20PA  
Retractor Equipment Roboz, Gaithersburg, MD 20898 USA RS-6514  
Isoflurane (Forane) Reagent Baxter 1001936040  
Ketamine HCl Reagent HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045 RL-0065  
Xylazine (AnaSed) Reagent Lloyd LB15705A  
Buprenorphine HCL Inject Reagent Bedford Labs, Bedford, OH 44146 USA Div-BUP-P00  
Bupivacaine 0.25% Reagent HOSPIRA Inc., Lake Forest, IL 60045    

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Citar este artigo
Sill, B., Alpatov, I. V., Pacak, C. A., Cowan, D. B. Implantation of Engineered Tissue in the Rat Heart. J. Vis. Exp. (28), e1139, doi:10.3791/1139 (2009).

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