हम अमेरिकी लॉबस्टर के पेट से stomatogastric तंत्रिका तंत्र के ठीक विच्छेदन वर्णन (<i> Homarus americanus</i>).
समझ तंत्रिका प्रणाली कैसे गतिविधि उत्पादन और पर्यावरण के लिए जवाब के लक्ष्य के साथ, neuroscientists मॉडल प्रणाली है कि ब्याज की गतिविधि प्रदर्शन और सुलभ और प्रयोगात्मक विधियों के लिए उत्तरदायी हैं करने के लिए बारी है. अमेरिकी लॉबस्टर की stomatogastric तंत्रिका प्रणाली (STNS) (<i> Homarus americanus</i>, यह भी पता है कि अटलांटिक या मेन लॉबस्टर था) नेटवर्क और नेटवर्क के neuromodulation पैदा ताल के अध्ययन के लिए एक मॉडल प्रणाली के रूप में स्थापित किया गया है. STNS 3 पूर्वकाल (2 commissural ganglia और एक oesophageal नाड़ीग्रन्थि) ganglia, modulatory न्यूरॉन्स कि stomatogastric नाड़ीग्रन्थि (STG) के लिए केन्द्र परियोजना युक्त होते है. STG लगभग 30 न्यूरॉन्स कि दो केंद्रीय पैटर्न पैदा नेटवर्क शामिल है, जठरनिर्गम और गैस्ट्रिक नेटवर्क है कि क्रसटेशियन में खिला व्यवहार आबाद हैं<sup1,2></sup>. हालांकि यह संभव है करने के लिए इस प्रणाली का अध्ययन<i> Vivo में</i<sup> 3</sup> STNS जब पृथक करने के लिए अपने लयबद्ध गतिविधि उत्पादन जारी<i> इन विट्रो में</i>. एक डिश में STNS की शारीरिक अलगाव intracellular electrophysiological रिकॉर्डिंग के लिए ganglia में somata और बाह्य रिकॉर्डिंग के लिए STNS की नसों को आसान पहुँच के लिए अनुमति देता है. अलग STNS एक दो भाग प्रक्रिया है. पहले भाग, जानवर से पेट विदारक, एक साथ वीडियो लेख में वर्णित है<sup> 4</sup>. इस वीडियो लेख में, ठीक विच्छेदन तकनीक पेट से STNS अलग उपयोग किया जाता है. यह प्रक्रिया एक तंत्रिका तंत्र की तैयारी है कि electrophysiological रिकॉर्डिंग के लिए उपलब्ध है में परिणाम है.
लॉबस्टर पेट और STNS का शरीर रचना विज्ञान अच्छी तरह से किया गया है 5,6 पहले से वर्णित है, और इस विच्छेदन प्रक्रिया के बदलाव के कई अध्ययनों में उपयोग किया गया है. हम 5-7 और पहले शुरुआत dissections STNS 5,8 पेट की शारीरिक रचना के साथ परिचित बनने की सलाह देते हैं. इस तरह परिचित नसों और ऊतकों को आकस्मिक नुकसान के जोखिम को कम करेगा.
तैयारी के स्वास्थ्य को बनाए रखने के लिए, यह करने के लिए एक ठंडे तापमान पर तैयार बनाए रखने के लिए महत्वपूर्ण है. यह आसानी से खारा 4 के साथ हर 30 मिनट ˚ सी खारा एक रेफ्रिजरेटर में रखा का आदान प्रदान करके हासिल की है. जब ठंड खारा में डूबे, पृथक STNS तैयारी कई घंटे के लिए व्यवहार्य है. STG से संबंधित Homarus gammarus में रिकॉर्डिंग स्थिर लयबद्ध गतिविधि का प्रदर्शन किया है, 9 इन विट्रो में 5 दिनों के दौरान इसी तरह की मजबूती एच. में देखा गया है americanus (OBS pers.).
Modulatory commissural ganglia से STG करने के लिए इनपुट के लिए चल रहे मोटर पैटर्न के संरक्षण की आवश्यकता है. इसलिए, एक सामान्य लयबद्ध गतिविधि इन ganglia और आयन बेटे को बनाए रखने के लिए, और STN नसों बरकरार रखा जाना चाहिए. विच्छेदन हम वर्णन कई मोटर तंत्रिकाओं (मोटर न्यूरॉन axons युक्त) को बरकरार रखता है: AGN एस (गैस्ट्रिक मिल axons (जीएम) युक्त), mvn एस (पार्श्व (एलजी) गैस्ट्रिक और अवर कार्डिएक axons (आईसी) युक्त ), pyn (जठरनिर्गम न्यूरॉन axons (PY) से युक्त), PDN एस, और LVN (पार्श्व जठरनिर्गम (LP), औसत दर्जे का (एमजी) गैस्ट्रिक, एलपीजी axons के रूप में अच्छी तरह के रूप में जीएम से उन युक्त (जठरनिर्गम (पीडी) axons फैलनेवाली पेशी युक्त ) पीडी और PY). अतिरिक्त नसों (या अलग) विदारक अन्य मोटर न्यूरॉन axons दर्ज किया जा सकता है. मोटर न्यूरॉन अक्षतंतु के प्रत्येक व्यक्ति के प्रकार विदारक और तंत्रिका से जो मांसपेशियों रिकॉर्डिंग innervating द्वारा व्यक्तिगत रूप से दर्ज हो सकता है न्यूरॉन परियोजनाओं की है कि प्रकार है.
यह तैयारी तंत्रिका तंत्र समारोह पर ध्यान केंद्रित अध्ययन की एक किस्म के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. न्यूरॉन्स की गतिविधियों या तो somata या axons से intracellular, तेज इलेक्ट्रोड रिकॉर्डिंग का उपयोग कर, या बिजली के उद्यमी नसों से extracellularly रिकॉर्डिंग से दर्ज किया जा सकता है. STG न्यूरॉन्स में कई आयन चैनल आंशिक रूप से क्लोन किया गया है और mRNA मैन्युअल रूप से खींचा somata 10,11 से मापा जा सकता है है.
हम हमारे सलाहकार, डॉ. ईव Marder स्वीकार करना चाहते हैं. इस शोध ईव Marder और NS059255 स्वास्थ्य NS17813 अनुदान के राष्ट्रीय संस्थान द्वारा एई टी. समर्थित किया गया
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
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Fine Tungsten Wire (0.001 in. diameter) | Tool | California Fine Wire | Cut into 1-2mm pieces to use as fine pins. | |
Forceps #5 | Tool | FST | 91150-20 | |
Minuten Pins | Tool | FST | 26002-10 | |
Moria Spring Scissors (7mm blades) | Tool | FST | 15370-52 | These are the top of the line. There are more economical spring scissors available from the same company. |
Petri Dish (100x15mm) | Tool | Fischer | 08-757-12 | Fill 2-4mm with Sylgard 182. |
Sylgard 182 | Outro | Dow Corning | 182 | |
Pin Holder | Tool | FST | 26018-17 | Optional. Desheathing can be done with scissors and fine forceps alone. |
Super fine forceps #5SF | Tool | FST | 11252-00 | |
Tungsten Needles | Tool | FST | 10130-05 | Optional. Desheathing can be done with scissors or with pins cut from fine tungsten wire. |
Dissection microscope |