Рак Borealis стоматогастральных нервной системы Dissection
Summary
Стоматогастральных нервной системы (ст.) из краба Иона (<em> С. Borealis</em>) Может быть использован для электрофизиологии, иммуногистохимии, и исследования клеточных культур. Добыча ст. делается из двух частей: общей и мелкой рассечение.
Abstract
Стоматогастральных ганглии (STG) является прекрасной моделью для изучения клеточных и сетевые взаимодействия, поскольку она содержит относительно небольшое число клеток (примерно 25 в С. сияние), которые хорошо охарактеризованы. Клеток в STG выставке широкий спектр выходами и несут ответственность за двигательным действиям желудка. Желудок содержит желудочный мельница который расщепляет пищу с тремя внутренними зубами, и привратника, который фильтрует пищу, прежде чем попасть кишки. STG производит два ритмических выходов для управления желудочной мельницы и привратника известный как центральные генераторы шаблон (CPGs). Каждая ячейка в STG может принять участие в одном или обоих этих ритмов. Эти CPGs позволяют изучение нейромодуляции, гомеостаз, сотовой сети и изменчивость, развитие сети и сетевые восстановления.
Рассечение стоматогастральных нервной системы (ст.) из краба Иона (Рак сияние) осуществляется в два этапа; общей и мелкой рассечение. В валовом рассечение всей желудка рассекается из краба. Во время вскрытия штраф ст. извлекается из желудка с помощью микроскопа рассечение и микро-рассечение инструментов (см. рисунок 1). Ст. включает STG, пищевода ганглии (ОГ) и спаечный ганглиев (ЦТ), а также нервы, которые иннервируют мышцы живота. Здесь мы покажем, как выполнить полное рассечение ст. при подготовке эксперимента электрофизиологии, где клетки в STG будет записан с внутриклеточно и периферических нервов будет использоваться для внеклеточных записей. Правильную технику для поиска нужной нервы показано, а также наши техники desheathing ганглия выявить somata и нейропиля.
Protocol
Discussion
Рассечение ст. является первым шагом в выполнении электрофизиологии или иммуногистохимии эксперимент, или для получения клеток для клеточной культуры. Независимо от того, предназначена эксперимент, валовой рассечение останется без изменений. Тем не менее, прекрасно вскрытия могут бы…
Acknowledgements
Мы выражаем глубокую признательность членам Лаборатории Мардер. Мы благодарим наших советник, доктор Ева Мардер, за ее поддержку и поощрение. Работа выполнена при поддержке Национального института неврологических расстройств и инсульта Гранты NS-17 813 и NS-058 110.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Black Sylgard 170 | Outro | Dow Corning | 170 | Gross Dissection |
| Fine Scissors | Surgery | FST | 14090-09 | |
| Insect Pins size 6 | Surgery | FST | 26000-65 | |
| Mayo Scissors | Surgery | FST | 14110-17 | |
| Micro-Spatula | Surgery | Ward Sci. | 15 V 4313 | |
| Rongeurs | Surgery | FST | 16000-14 | |
| Tissue Forceps | Surgery | FST | 11021-12 | |
| Fine Tungsten Wire (0.001 in. diameter) | Surgery | California Fine Wire | Fine Dissection | |
| Forceps #5 | Surgery | FST | 91150-20 | |
| Minuten Pins | Surgery | FST | 26002-10 | |
| Moria Spring Scissors (7mm blades) | Surgery | FST | 15370-52 | |
| Petri Dish (100x15mm) | Outro | Fischer | 08-757-12 | |
| Pin Holder | Surgery | FST | 26018-17 | |
| Super fine forceps #5SF | Surgery | FST | 11252-00 | |
| Sylgard 182 | Outro | Dow Corning | 182 | |
| Tungsten Needles | Surgery | FST | 10130-05 | |
| Dissecting Microscope | Microscope | Wild | MC3 | Misc. |
| Jonah Crab (C. borealis) | Animal | Commercial Lobster |
Referências
- Harris-Warrick, R. M., Marder, E., Selverston, A. I., Moulins, M. . Dynamic Biological Networks: The stomatogastric nervous system. , (1992).
- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).
- Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268 (892), 161-220 (1974).
- Selverston, A. I., Russell, D. F., Miller, J. P. The Stomatogastric Nervous System: Structure and function of a small neural network. Prog. Neurobiology. 7, 215-290 (1976).
