Summary

エラスターゼによるマウス実験的腹部大動脈瘤の作成

Published: July 23, 2009
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Summary

このビデオでは、腹部大動脈の大動脈セグメントにブタ膵臓エラスターゼの過渡腔内注入を介してマウスでは腹部大動脈瘤(AAA)を誘導する方法を示しています。モデルは、多数のトランスジェニックやノックアウトマウスの進展に伴い、AAAの病理に広範な洞察を追加する機能を持っています。

Abstract

腹部大動脈の大動脈セグメントにブタ膵臓エラスターゼの過渡腔内注入は、最初にAnidjarらによってラットで説明されて以来、腹部大動脈瘤(AAA)の最も広く使用されている動物モデルである。その開発は1理論的根拠をベースにしたエラスチンの破砕性質にAAASで観察。このラットモデルは、マウスの大動脈大動脈領域でAAASを生成するように変更されています。2モデルは、多数のトランスジェニックやノックアウトマウスの進展に伴い、AAAの病理に広範な洞察を追加する機能を持っている。また、AAAのために潜在的な治療薬をテストするために実行可能なプラットフォームです。このビデオでは、我々は我々の研究室で使用されるエラスターゼ注入AAAの手順を示しています。

マウスは、イソフルラン2.5%を使用して麻酔し、そして開腹術を無菌条件下で行われる。腹部aortaisは営業実体顕微鏡(ライカ)の支援により単離した。近位と遠位大動脈周囲に一時的な合字を配置した後、大動脈切開は30ゲージの針の先端との分岐で作成されます。 PE – 10ポリエチレン管の熱テーパーセグメントは、大動脈切開を介して導入して保護されています。大動脈内腔は、その後、生理食塩水を含むI型ブタ膵臓エラスターゼ(;シグマケミカル社4.5 U / mL)を、100 mmHgで5-15分のために灌流される。灌流カテーテルを除去した後、大動脈切開は、内腔の狭窄なしに修復されます。

Protocol

マウスは、吸入イソフルラン2.0〜3.0ミリリットル/ Lで麻酔腹部を剃毛し、アルコールとbetadineでスクラブされています。 マウスは、術野に仰臥位に配置されます。 滅菌手袋は、外科医が着用され、そして使用される機器は、ホットビーズ滅菌器で滅菌されています。 長い正中腹部切開が行われます。腹部の内容は、腹部大動脈を露出するために滅菌ガーゼと腹部の外に退避さ…

Discussion

これまでの研究では、さまざまな商業エラスターゼ製剤を3からAAAの開発における重要なロット間のばらつきを指摘している。従って、それはAAASを誘導する準備の能力を文書化するために、適切な対照群を持っているだけでなく、生産ロットを監視することが重要です。

興味深いことに、このモデルではAAAの開発に対する感受性は、3を使用したマウス系?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

国立衛生研究所から(P50 HL083800 – 03):この作品はSCCOR助成金"のメカニズム、階層、および治療AAA病の"サポートされていました

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Type I porcine pancreatic elastase Reagent Sigma E1250  
polyethylene tubing (PE-10)   CLAY ADAMS 427400  
CHANGE-A-TIP   Bovie 18010-00 (FST) cautery knife
LEICA MZ6   Leica   stereomicroscope
LEICA DFC290HD   Leica   USB camera
Image Pro Express ver. 6.0   Media Cybernetics   software

Referências

  1. Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
  2. Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1641 (2000).
  3. Carsten, C. G., Calton, W. C., Johanning, J. M. Elastase is not sufficient to induce experimental abdominal aortic aneurysms. J Vasc Surg. 33 (6), 1255-1255 (2001).
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Citar este artigo
Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. Creation of Murine Experimental Abdominal Aortic Aneurysms with Elastase . J. Vis. Exp. (29), e1280, doi:10.3791/1280 (2009).

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