Summary

La cateterización de asas intestinales en rumiantes

Published: June 11, 2009
doi:

Summary

Se describe un nuevo método quirúrgico para la cateterización "asas intestinales" en el íleon de los ovinos. Una vez que los animales se han recuperado de la cirugía y han limpiado los antibióticos y analgésicos, múltiples tratamientos pueden ser depositados directamente en los bucles a través de los catéteres.

Abstract

El intestino es una estructura compleja que está involucrado no sólo en la absorción de nutrientes, sino que también actúa como una barrera entre el individuo y el mundo exterior. Como tal, el intestino desempeña un papel fundamental en inmunovigilancia y la protección de los agentes patógenos entéricos. La investigación de la fisiología y la inmunología intestinal habitualmente emplea 'asas intestinales "como modelo experimental. La mayoría de estos modelos de ciclo no son la recuperación de los procedimientos quirúrgicos que estudio a corto plazo (<24 h) cambios en el intestino (1-3). Anteriormente hemos creado un modelo de recuperación de asa intestinal para medir específicamente a largo plazo (<6 meses) los cambios inmunológicos en el intestino de oveja siguiente exposición a las vacunas, adyuvantes y virus (4). Este procedimiento tratamientos localizados a un determinado 'loop', lo que nos permite probar esta zona del intestino. Una desventaja importante de este método es la única ventana de oportunidad para administrar los tratamientos (es decir, en el momento de la cirugía). Además, las muestras tanto de la mucosa intestinal y el contenido luminal sólo pueden ser tomadas a la terminación del proyecto. Otras limitaciones más destacados del modelo anterior es que la manipulación quirúrgica y post-operatorio requerido medidas (por ejemplo, administración de antibióticos y analgésicos) puede afectar directamente el propio tratamiento y / o alterar la función inmune, por lo tanto los resultados de confusión. Por lo tanto, hemos modificado nuestro modelo de asa intestinal mediante la inserción de catéteres a largo plazo en los lazos. Las ovejas se recuperan totalmente del procedimiento, y se ven afectados por los catéteres exteriorizados. En particular, el establecimiento de los catéteres en los bucles nos permite introducir múltiples tratamientos en un intervalo prolongado, después de la recuperación de la cirugía y la eliminación de los fármacos administrados durante la cirugía y el período post-operatorio.

Protocol

Procedimiento experimental: Todos los instrumentos se esterilizan en autoclave, no autoclaveable materiales son esterilizados en una solución de esterilización en frío Germex por un mínimo de 10 min. Las ovejas son premedicados con acepromacina (0,05 mg / kg), glicopirrolato (0.005 mg / kg), y el tartrato de butorfanol (0,2 mg / kg) de mensajería instantánea, y se fue a 15-20 minutos. El cuello se afeita y se ha borrado de la piel quirúrgicamente. Una vez que la vena yugular se visu…

Discussion

En este procedimiento, hemos sido capaces de establecer con éxito los catéteres en las asas intestinales establecido en el íleon de los ovinos. Al adherirse a estrictos cuidados post-operatorios, los animales se recuperaron rápidamente del procedimiento, se reanuda la actividad normal de 5-7 días después de la cirugía. Se determinó que el establecimiento de los catéteres dentro de los ciclos no afecta la función inmune o la mucosa intestinal (datos no mostrados) y los animales pueden vivir por lo menos 8 seman…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

La investigación no podría haberse completado sin la dedicación y el esfuerzo de muchas personas en la Agriculture and Agri-Food Canada Research Centre, Lethbridge, Alberta, Canadá. En ese sentido, agradecemos a: Tara Shelton para pre-y post-operatorio de atención de los animales, la preparación quirúrgica, y anestesiología, el análisis de las muestras, y ayuda con imágenes de vídeo; Randy Wilde y Costa Estela de la atención pre-y post-operatorio; Jenny Gusse para el análisis de la muestra, Byron Lee para la imagen de trocar, y Brian Egland de cría de ovejas. También agradecemos a Brent Selinger (Departamento de Ciencias Biológicas de la Universidad de Lethbridge) para el suministro de equipo de vídeo y asesoramiento, así como otro tipo de ayuda (es decir, producción ejecutiva), y el Plan de Estudios Re-Centro de Desarrollo de la Universidad de Lethbridge de experiencia videografía. Este estudio fue apoyado en parte por subvenciones de los Alimentos y la Red Avanzada de Materiales (GDI), el Canadá-Alberta Industria de Carne Fondo para el Desarrollo (GDI), y de Agricultura y Agroalimentación de Canadá (GDI y JPK).

Materials

Category / Item NumberCompanyCatalogue
Surgeon supplies
Surgical glovesWDDCa103091
Surgical maskWDDCMAX53013
Surgical gownCDMVb3365
OB ApronWDDC900062
Surgical capWDDC903271
EZ Scrub brushWDDCBDC377479
Anesthesia and drugs
Anesthetic machineBoyle
SodasorbWDDC108638
LaryngoscopeWDDC
Laryngoscope blade (Miller blade #4)WDDC902667
Endotracheal tube (7.0 – 8.5 mm)WDDC
Lidocaine endotracheal sprayWDDC103364
AcepromazineWDDCAUS01020
GlycopyrrolateWDDCSAB2880
Butorphanol tartrateWDDCAYE304541
DiazepamWDDCsab790
Thiopental sodiumWDDC103508
Epinephrine hydrochlorideWDDC103856
DoxapramStrathcona Pharmacy
IsofluraneWDDC100339
HemostamWDDC103857
FlunixinWDDCsch140100
EnrofloxacinWDDChll0049
MetronidazoleWDDC101653
AmpicillinWDDCNOV67185-6
CefazolinWDDCnov69397
Surgical equipment and supplies
ElectroscapelMacanMV8
Heating matKanePHMD-48
Stomach tube (Nalgene tubing 5/16″ ID)Fisher Scientific
Needle driverWDDC108338
Addison brown forcepWDDC911075
Rat tooth forcepCDMV5275
Kelly forcepWDDC901133
Mosquito hemostatWDDC108471
Carmalt forcepWDDC901225
Scalpel handleWDDC900285
Scalpel blade #22WDDC900511
Metzenbaum scissorWDDC901166
Sharp-sharp scissorWDDC108264
Towel clampWDDC901213
Allis tissue forcepWDDC901201
Doyen’s forcepWDDC904226
Stainless steel bowlWDDC903601
Stainless steel trocar (curved)Local supplier
Catheter introducerWDDC11440
Surgical towelCDMV7972
Disposable drapeWDDC900035
Steri drapeCDMV2323
Drape (40 x 40 cm)CDMV8358
Surgical drape (7″ x 11 ¼” opening)CDMV2694
Vicryl (2-0)WDDCJJMJ333H
Silk 2-0WDDC105248
Catgut #3WDDCCSL547-2070
Supramid #1WDDCCSL547-3040
Needles (cutting and non-cutting)WDDC
Catheter
Silastic tubing (0.040″ ID, 0.085″ OD)Fisher Scientific11-189-15D
Orbeseal ointmentWDDC106344
Clear silicone (732 multi-purpose sealant)Local supplier
Blunt end needleWDDC905035
Marker (permanent industrial)Local supplier
Catheter pouch (constructed of Elastoplast 7.5 cm)WDDC104094
Bandages
Hospital tape (2″)WDDC103842
Hospital tape (1″)WDDCVLMRENF20
Gauze sponge 4×4WDDC107551
Gauze clingWDDC107633
Elastoplast 7.5cmWDDC104094
Elastoplast rippable bandageWDDC104093
Needles and syringes
Syringe (60 ml)WDDC104004
Syringe (10 ml)WDDCbdc301604
25G NeedleWDDCBDC305122
20G NeedleWDDCBDC305175
18G NeedleWDDC903353
Intravenous
Intracath IV catheter (16G 8″)WDDCbdc3831621
IV administration set (10 drop)WDDC101797
0.9% NaCl solutionWDDCBAXJB1322P
Plasmalyte 148 solutionWDDCBAXJB2534
DextroseWDDCMCT60190
Peristaltic pumpCole Parmer7524-10
Livestock identification tag cementLocal supplier
Sanatizers / disinfectants
Germex solutionWDDCmtc60270
Isopropyl alcoholWDDC104590
Stanhexidine cleanserWDDC109248
Prepodyne solutionWDDC105710
Prepodyne scrubWDDC105711

aWestern Drug Distribution Center LTD, Edmonton, AB.

bThe Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE.

Referências

  1. Vidal, J. E., McClane, B. A., Saputo, J., Parker, J., Uzal, F. A. Effects of Clostridium perfringens beta-toxin on the rabbit small intestine and colon. Infect. Immun. 76, 4396-4404 (2008).
  2. Santos, R. L., Zhang, S., Tsolis, R. M., Baumler, A. J., Adams, L. G. Morphologic and molecular characterization of Salmonella typhimurium infection in neonatal calves. Vet. Pathol. 39, 200-215 (2002).
  3. Uzzau, S., Leori, G. S., Petruzzi, V., Watson, P. R., Schianchi, G., Bacciu, D., Mazzarello, V., Wallis, T. S., Rubino, S. Salmonella enterica serovar-host specificity does not correlate with the magnitude of intestinal invasion in sheep. Infect. Immun. 69, 3092-3099 (2001).
  4. Gerdts, V., Uwiera, R. R. E., Mutwiri, G. K., Wilson, D. J., Bowersock, T., Kindane, A., Babiuk, L. A., Griebel, P. J. Multiple intestinal ‘loops’ provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses. J. Immunol. Methods. 256, 19-33 (2001).
  5. Greibel, P. J., Davis, W. C., Reynolds, J. D. An analysis of the growth and differentiation of b cells isolated from follicles from ileal Peyer’s patch of sheep. Immunology. 75, 601-607 (1992).
  6. Motyka, G., Greibel, P. J., Reynolds, J. D. Agents that activate protein kinase C resue sheep ileal Peyer’s patch B cells from apoptosis. Eur. J. Immunol. 23, 1314-1321 (1993).
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Citar este artigo
Uwiera, R. R. E., Kastelic, J. P., Inglis, G. D. Catheterization of Intestinal Loops in Ruminants. J. Vis. Exp. (28), e1301, doi:10.3791/1301 (2009).

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