فأري النموذجي لمرض باركنسون : من آفة الدوبامين 6 - OH إلى اختبار السلوكية
Summary
ويتسبب مرض باركنسون بفقدان تعصيب الدوبامين في المخطط ، والذي يمكن أن يتسبب تجريبيا بواسطة 6 – OH الدوبامين. نحن تصف كيفية تنفيذ الآفة التجسيمي ورصد آبومورفين بفعل السلوك التناوب في الفئران. هذا النموذج هو مفيدة وموثوقة لاختبار علاجات جديدة لمرض باركنسون.
Abstract
مرض باركنسون (PD) يؤثر على ما لا يقل عن 6.5 مليون شخص في جميع أنحاء العالم ، بغض النظر عن الجنس ، والحدود الاجتماعية والعرقية والاقتصادية ، أو جغرافية. الأعراض الرئيسية ، مثل الصلابة ، ورعاش وbradikinesia ، تتطور عندما يتم فقدان حوالي 3 / 4 من خلايا الدوبامين في المادة السوداء ، وتفشل في توفير التنظيم والتنسيق السلس للدوائر مخططي السيارات. الاكتئاب والهلوسة شائعة ، والخرف في نهاية المطاف يحدث في 20 ٪ من المرضى. في هذا الوقت ، لا يوجد علاج لتأخير أو وقف تطور PD. بل إن الهدف الأدوية المتوفرة حاليا أكثر من أجل التخفيف من هذه الأعراض. قد استراتيجيات جراحية جديدة التبديل عكسية على الدوائر العصبية المتضررة وظيفيا من خلال التحفيز الكهربائي للهياكل العميق للمخ ، ولكن على الرغم من أن للمخ يمثل تقدما كبيرا ، فإنه ليست مناسبة لجميع المرضى. ولذلك يبقى من الضروري اختبار نهج جديدة في علاج الخلايا نماذج قبل سريرية.
يمكن استنساخها اضطراب أعصاب الانتقائي للمسارات الدوبامين عن طريق الحقن من hydroxydopamine – 6 (6 – OHDA) أو MPTP (1 ميثيل فينيل – 4 – 1 – ،2،3،6 tertahydropyridine) في حين أوزون المخدرات والمواد الكيميائية المؤكسدة الضارة قد تتكاثر أيضا ميزات محددة من المشتريات في القوارض. خلافا MPTP ، 6 – OHDA الآفات العصبية تسبب في خسارة عدد هائل لا رجعة فيه ، ويمكن أحادي أو ثنائي. نموذج الآفة 6 OHDA غير موثوق بها ، ويؤدي إلى عجز المحرك القوي ، وهو الأكثر استخداما على نطاق واسع بعد 40 عاما من البحث في rats1. كما يمكن الآن التفاعلات بين الخلايا المطعمة والمضيف أن تدرس بدقة أكثر في الفئران وليس في الفئران ، فقد تم نقلها إلى نموذج 2،3 الفئران ، حيث تم مؤخرا أنها تتميز 4.
في هذا الفيديو ، ونحن لشرح كيفية آفة اليسار nigro – مخططي مسار تخدير الفئران عن طريق تقديم ببطء 2.0 ميكرولتر من OHDA – 6 من خلال إبرة حقنة صغيرة إدراج stereotaxically. فقدان الإدخال الدوبامين يحدث في غضون أيام ، ويمكن رصد أكثر من اعاقات وظيفية بعد الجراحة الأسابيع والأشهر التي تناوب تصنيف الحيوانات التي تحدثها عوامل الدوبامين 5. هنا ، ونعرض كامل الجسم تناوب المقابل تحدث بعد 10 دقائق من ادارة واحدة تحت الجلد من آبومورفين ، وتقاس بعد شهر واحد الآفة. وتناقش النتائج والسلبيات أدناه.
Protocol
Discussion
لا يمكن أن يتحقق من جانب واحد آفة واسعة من المسار nigro – مخططي موثوق في الفئران عن طريق الحقن واحد من التجسيمي OHDA – 6 في المخطط. يمكن التحقق من مدى الآفة بعد الوفاة من قبل المناعية للهيدروكسيلاز التيروزين (الذي يحفز معدل الحد من مرحلة تجميع DA ، أي تحويل التيروسين – L لdihydroxyph…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
بدعم من قرينتها دي أمبارو a Pesquisa تفعل استادو دو ريو دي جانيرو (FAPERJ) وناسيونال دي Conselho Desenvolvimento Científico تكنولوجيكو ه (CNPq). ونحن ممتنون للحكام الذين المجهول التعليقات ساعدتنا تحسين كل من مخطوطة والفيديو.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Ketamine hydrochloride | König | 90-120 mg/Kg | ||
| Xylazine hydrochloride | König | 10 mg/Kg | ||
| Atropine Sulfate | Isofarma | Isofarma | ||
| 6 – Hydroxydopamine Hydrochloride | Sigma-Aldrich | 5 μg/μL | ||
| L – Ascorbic Acid | USB Corporation | 0.2% | ||
| Xylocaine (Lidocaine Chloridrate) |
ASTRA Chemistry | 5% 50 mg |
||
| Nebacetin (Neomycin Sulfate + Bacitracin) | Altana Pharma | 5 mg/g + 250 Ul/g | ||
| R-(-)-Apomorphine hydrochloride | Sigma-Aldrich | 0.5 mg/Kg | ||
| GenTeal lOphthalmic ointment Hypromellose |
NOVARTIS | 0.33% |
||
| Ibuprofen | Abbott | 4 mg/ 100 ml drinking water | ||
| Povidine | JohnsonDiversey | |||
| R-(-)-Apomorphine hydrochloride | Sigma-Aldrich | 0.5 mg/Kg |
Referências
- Ungerstedt, U. 6-hydroxy-dopamine induced degeneration of central monoamine neurons. Eur. J. Pharmacol. 5, 107-110 (1968).
- Akerud, P., Canals, J. M., Snyder, E. Y., Arenas, E. Neuroprotection through delivery of glial cell line-derived neurotrophic factor by neural stem cells in a mouse model of Parkinson’s Disease. J. Neurosci. 21, 8108-8118 (2001).
- Ghosh, A., Roy, A., Liu, X., Kordower, J. H., Mufson, E. J., Hartley, D. M., Ghosh, S., Mosley, R. L., Gendelman, H. E., Pahan, K. Selective inhibition of NF-kappaB activation prevents dopaminergic neuronal loss in a mouse model of Parkinson’s Disease. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 104, 18754-18759 (2007).
- Alvarez-Fischer, D., Henze, C., Strenzke, C., Westrich, J., Ferger, B., Höglinger, G. U., Oertel, W. H., Hartmann, A. Characterization of the striatal 6-OHDA model of Parkinson’s disease in wild type and a-synuclein-deleted mice. Exp. Neurol. 210, 182-193 (2008).
- Ungerstedt, U. 6-Hydroxydopamine-induced degeneration of the nigrostriatal dopamine pathway: The turning syndrome. Pharmacology and Therapeutics Part B: General and Systematic Pharmacology. 2, 37-40 (1976).
- . . Guidelines for the Care and Use of Mammals in Neuroscience and Behaviour Research. , 209 (2003).
- Franklin, K. B. J., Paxinos, G. . The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. , (1997).
- Hudson, J. L., Horne, C. G. v. a. n., Strömberg, I., Brock, S., Clayton, J., Masserano, J., Hoffer, B. J., Gerhardt, G. A. Correlation of apomorphine- and amphetamine-induced turning with nigrostriatal dopamine content in unilateral 6-hydroxydopamine lesioned rats. Brain Res. , 626-6167 (1993).
- Truong, L., Allbutt, H., Kassiou, M., Henderson, J. M. Developing a preclinical model of Parkinson’s disease: A study of behaviour in rats with graded 6-OHDA lesions. Behav. Brain Res. 169, 1-9 (2006).
- Harvey, B. K., Wang, Y., Hoffer, B. J. Transgenic rodent models of Parkinson’s disease. Acta Neurochir. (Wien.). 101, 89-92 (2008).
- Isacson, O. Ole Isacson: Development of New Therapies for Parkinson’s Disease. JoVE. 3, (2007).
