Summary

心臓全体のイメージング用蛍光光学投影トモグラフィのために生まれたの正規化

Published: June 02, 2009
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Summary

我々は、撮像された試料の吸収特性のためのアカウントが正確かつ定量的な蛍光トモグラフィー再構成を取得すること(BnOPT)光学投影トモグラフィのために生まれ、正規化手法を提案する。我々は、小動物の臓器内の蛍光分子プローブの分布を再構成するために提案されたアルゴリズムを使用してください。

Abstract

光学投影断層は、最近、主に発生生物学と遺伝子発現研究におけるイメージングツールとして導入された三次元イメージング技術です。テクニックは、最初にそれらを脱水し、ベンジルアルコールと2:1の比(バブやマレーの透明な溶液)中の安息香酸ベンジルの混合物に配置することにより、光学的に透明な生物学的サンプルをレンダリングします。テクニックは、まずベンジルアルコールおよびクリアするために2:1(バブやマレーの透明な溶液)中の安息香酸ベンジルの混合物でそれらを置く段階的エタノール溶液でそれらを脱水することにより光学的に透明な生物試料をレンダリングします。吸収の寄与を完全に排除することができないままクリア処理後の試料の散乱の寄与が大幅に削減し、ほとんど無視できる程度にすることができます。調査中のサンプル内の蛍光分布を再構成しようとすると、この寄与は、画像アーチファクトと定量化誤差に、必然的に、再構成し、リード線に影響を与えます..吸収がクリアメディアの数週間または数ヶ月の永続性をさらに低減することができるが、これは蛍光の進行性消失すると非現実的な長いサンプル処理時間につながる。両方外因性造影剤(分子造影剤)と同様に内因性のコントラスト(遺伝的に発現する蛍光蛋白質の例再建)を再構築するときにこれは本当です。

Protocol

イメージングの手順実験セットアップを図1に詳細に示されています。光源LSは、吸収測定用の照明として、蛍光測定用の励起源としての両方の役割を果たし、それは狭いバンドパス干渉フィルタBPFでフィルタリングされます。 Sは試料に光の量を制御するために、任意の光退色を防ぐのに十分それを低く維持するための自​​動シャッターの存在と組み合わせて、固定と可…

Acknowledgements

C. Vinegoniは衛生研究所(NIH)助成1 – RO1 – EB006432の国立研究所からの支援を認めている。

Referências

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Vinegoni, C., Razansky, D., Figueiredo, J., Fexon, L., Pivovarov, M., Nahrendorf, M., Ntziachristos, V., Weissleder, R. Born Normalization for Fluorescence Optical Projection Tomography for Whole Heart Imaging. J. Vis. Exp. (28), e1389, doi:10.3791/1389 (2009).

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