טיהור של המיטוכונדריה מתאי שמרים
Summary
אנו מתארים שיטה מהירה ויעילה לטיהור של המיטוכונדריה של השמרים<em> Saccharomyces cerevisiae</em>. שיטה זו מאפשרת את הבידוד גבוהה תשואה של המיטוכונדריה טהור חופשיים בעיקרו של זיהום על ידי אברונים אחרים ולשמור על השלמות המבנית תפקודית לאחר הטיהור שלהם.
Abstract
המיטוכונדריה הם האתר העיקרי של ייצור ה-ATP במהלך המטבוליזם האירובי שאינם פוטוסינתטיים התאים האיקריוטים<sup> 1</sup>. אברונים אלה מורכבים לשחק גם תפקידים חיוניים מוות של תאים אפופטוטיים<sup> 2</sup>, התא הישרדות<sup> 3</sup>, יונקים פיתוח<sup> 4</sup> פיתוח, תפקוד עצבי ו<sup> 4</sup>, איתות תאיים<sup> 5</sup>, ואריכות ימים תקנה<sup> 6</sup>. ההבנה שלנו של תהליכים ביולוגיים מורכבים אלה נשלט על ידי המיטוכונדריה מסתמך על שיטות חזקים להערכת המורפולוגיה שלהם, חלבון שלהם הרכב השומנים, על שלמות ה-DNA שלהם, תפקידים חיוניים רבים שלהם. שמרים ניצני<em> Saccharomyces cerevisiae</em>, Eukaryote גנטית ביוכימית unicellular manipulable עם הגנום המבואר ומוגדרת היטב proteome, הוא מודל יקר ערך לחקר המנגנונים המולקולריים שבבסיס ו הסלולר תפקודים ביולוגיים חיוניים של המיטוכונדריה. עבור סוגים אלה של מחקרים, חשוב להיות המיטוכונדריה טהור מאוד. כאן אנו מציגים תיאור מפורט של שיטה מהירה ויעילה לטיהור שמרים המיטוכונדריה. שיטה זו מאפשרת את הבידוד של המיטוכונדריה מאוד טהור, כי הם חופשיים בעיקרו של זיהום על ידי אברונים אחרים ולשמור על השלמות המבנית תפקודית לאחר הטיהור שלהם. המיטוכונדריה מטוהרים בשיטה זו מתאימים הכינון מחדש תאים ללא תהליכי המיטוכונדריה חיוני והוא יכול לשמש לניתוח מבנה ופונקציות המיטוכונדריה, proteome המיטוכונדריה ו lipidome, ו-DNA המיטוכונדריאלי.
Protocol
Discussion
שיטה זו מאפשרת את הבידוד עתירי יבול של המיטוכונדריה טהור מתאי שמרים. המיטוכונדריה מטוהרים בשיטה זו חופשיים בעיקרו של זיהום על ידי אברונים אחרים ולשמור על השלמות המבנית תפקודית לאחר הטיהור שלהם. השיטה המתוארת התשואות המיטוכונדריה המתאימים הכינון מחדש תאים ללא תהליכ…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי מענקי CIHR לבין NSERC של קנדה. ויט הוא חוקר חדש CIHR ו קונקורדיה יו"ר אוניברסיטת מחקר Genomics, ביולוגיה של התא והזדקנות.
Referências
- Voet, D., Voet, J. G. Biochemistry. , (2004).
- Suen, D. -. F., Norris, K. L., Youle, R. J. Mitochondrial dynamics and apoptosis. Genes Dev. 22, 1577-1590 (2008).
- Cheng, W. C., Berman, S. B., Ivanovska, I., Jonas, E. A., Lee, S. J., Chen, Y., Kaczmarek, L. K., Pineda, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Hardwick, J. M. Mitochondrial factors with dual roles in death and survival. Oncogene. 25, 4697-4705 (2006).
- Detmer, S. A., Chan, D. C. Functions and dysfunctions of mitochondrial dynamics. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 8, 870-879 (2007).
- McBride, H. M., Neuspiel, M., Wasiak, S. Mitochondria: more than just a powerhouse. Curr. Biol. 16, R551-R560 (2006).
- Balaban, R. S., Nemoto, S., Finkel, T. Mitochondria, oxidants, and aging. Cell. 120, 483-495 (2005).
