In deze video presenteren we de microfluïdische probe<sup> 1</sup> (MFP). We leggen in detail hoe u de MFP assembleren, monteren bovenop een omgekeerde microscoop, en lijn deze ten opzichte van het substraat oppervlak, en tenslotte laten zien hoe het te gebruiken om een substraatoppervlak ondergedompeld in een bufferoplossing proces.
Abstract
Microfluïdische apparaten kunnen testen worden uitgevoerd met behulp van kleine hoeveelheden van het monster en zijn onlangs gebruikt om de micro-omgeving van de cellen te controleren. Microfluidics is vaak geassocieerd met gesloten microkanalen die hun gebruik te beperken tot monsters die kunnen worden ingevoerd, en gekweekt in het geval van cellen, in een beperkte volume. Aan de andere kant zijn micropipetting systeem gebruikt om lokaal perfuseren cellen en oppervlakken, met name met behulp van push-pull situaties waar een pipet fungeert als bron en het andere als zinken, maar de opsluiting van de stroming is moeilijk in drie dimensies. Bovendien, pipetten zijn kwetsbaar en moeilijk te positioneren en dus worden gebruikt in statische configuratie alleen.
De microfluïdische sonde (MFP) omzeilt de beperkingen opgelegd door de constructie van gesloten microfluïdische kanalen en in plaats van omsluiten het monster in de microfluïdische systeem, de microfluïdische stroom kan direct geleverd worden op het monster, en gescand over het monster, met behulp van de MFP. . De injectie en aspiratie openingen zijn gelegen binnen een enkele tientallen micrometers van elkaar, zodat een MicroJet geïnjecteerd in het gat wordt beperkt door de hydrodynamische krachten van de omringende vloeistof en volledig opgezogen terug in de andere opening. De MicroJet kan worden gespoeld over het substraatoppervlak en zorgt voor een nauwkeurige tool voor gelokaliseerde afzetting / levering van de reagentia die kan over grote gebieden worden gebruikt door het scannen van de sonde op het oppervlak. In deze video presenteren we de microfluïdische sonde 1 (MFP). We leggen in detail hoe u de MFP assembleren, monteren bovenop een omgekeerde microscoop, en lijn deze ten opzichte van het substraat oppervlak, en tenslotte laten zien hoe het te gebruiken om een substraatoppervlak ondergedompeld in een buffer proces.
Protocol
1. Microfabricage van de sonde kop (proces niet in de video) Een Si 2 wafer, vier centimeter in diameter, 525 micrometer dik, met een 1 micrometer dikke thermische SiO2 laag is spincoated met een fotolak (PR) voor 45 s bij 4000 toeren per minuut. De wafer wordt voorgebakken op 110C voor 50 s, en blootgesteld via een masker met alle elementen (havens en microkanalen) voor 5 s, ontwikkeld en gespoeld met DI. De onbedekte SiO2 is weg geëtst in een gebufferde 01:07 fluorwaterstofzu…
Discussion
De microfluïdische sonde (MFP) is veelzijdig, omdat het (i) mobiel, (ii) aanpasbaar voor gebruik met verschillende types van reagentia en substraat en het kan (iii) worden bediend over grote gebieden.
Ongewenste bellen kan leiden tot verstoring van de stroming om luchtbellen te vermijden, alle componenten moeten worden gevuld met vloeistof voorafgaand aan de montage. De kloof tussen de sonde en het oppervlak is slechts enkele micrometers, maar de mesa is enkele honderden micrometers breed, …
Acknowledgements
Dit werk werd gefinancierd door het Fonds de Recherche sur la Nature et les Technologies de Quebec, de Canada Fundation voor Innovatie en de Canadese Institutes of Health Research (CIHR).
Perrault, C. M., Qasaimeh, M. A., Juncker, D. The Microfluidic Probe: Operation and Use for Localized Surface Processing. J. Vis. Exp. (28), e1418, doi:10.3791/1418 (2009).