En este video se presenta la sonda de microfluidos<sup> 1</sup> (MFP). Se explica en detalle cómo ensamblar el MFP, montarlo sobre un microscopio invertido, y alinearla con respecto a la superficie del sustrato y, finalmente, mostrar cómo se utilizan para procesar una superficie de sustrato sumergido en una solución tampón.
Abstract
Dispositivos de microfluidos permiten los ensayos que se realizaron con cantidades de muestra y se han utilizado recientemente para controlar el microambiente de las células. Microfluídica se asocia comúnmente con microcanales cerrados que limitan su uso a las muestras que pueden ser introducidas y cultivadas en el caso de las células, dentro de un volumen reducido. Por otro lado, micropipetting sistema se han utilizado para la perfusión local y las superficies de las células, sobre todo con push-pull los casos en los actos de una pipeta como fuente y el otro como lavabo, pero el confinamiento del flujo es difícil en tres dimensiones. Además, las pipetas son frágiles y difíciles de colocar y por lo tanto se utilizan en la configuración estática.
La sonda de microfluidos (MFP) evita las limitaciones impuestas por la construcción de canales de microfluidos cerrado y en lugar de encerrar la muestra en el sistema de microfluidos, el flujo de microfluidos pueden ser entregados directamente en la muestra, y explora a través de la muestra, utilizando la impresora multifunción. . La inyección y las aberturas de aspiración se encuentran dentro de unas cuantas decenas de micrómetros de unos a otros para que un microjet se inyecta en el espacio es limitado por las fuerzas hidrodinámicas del líquido que rodea por completo y aspirar de nuevo en la otra abertura. El microjet se pueden eliminar a través de la superficie del sustrato y proporciona una herramienta precisa para la deposición localizada / o entrega de los reactivos que pueden ser utilizados en grandes áreas de exploración de la sonda sobre la superficie. En este vídeo se presentan los microfluidos sonda 1 (MFP). Se explica en detalle cómo ensamblar el MFP, montarlo sobre un microscopio invertido, y alinearla con respecto a la superficie del sustrato y, finalmente, mostrar cómo se utilizan para procesar una superficie de sustrato sumergido en una solución tampón.
Protocol
1. Microfabricación de la cabeza de la sonda (proceso que no aparecen en el video) Una oblea de Si-2, cuatro pulgadas de diámetro, 525 micras de espesor, con una capa de SiO2 1 m de espesor térmico es spincoated con un fotoprotector (PR) durante 45 s a 4000 rpm. La oblea se precocidos a 110 ° C durante 50 s, y se expone a través de una máscara con todos los elementos (puertos y microcanales) durante 5 s, desarrollado y aclarado con DI. El SiO2 descubierto es grabado en un …
Discussion
La sonda de microfluidos (MFP) es muy versátil, ya que es (i) móvil, (ii) adaptable para su uso con diferentes tipos de reactivos y el sustrato y se puede (iii) ser manejados en grandes áreas.
Burbujas no deseado puede llevar a la interrupción del flujo Para evitar burbujas, todos los componentes tienen que ser llenado con líquidos antes de su montaje. La brecha entre la sonda y la superficie es sólo de unos pocos micrómetros, sin embargo, la mesa es de varios cientos de micrómetros …
Acknowledgements
Este trabajo fue financiado por el Fonds de Recherche sur la Nature et les Tecnologías de Quebec, la Fundación Canadiense para la Innovación y los Institutos Canadienses de Investigación en Salud (CIHR).
Perrault, C. M., Qasaimeh, M. A., Juncker, D. The Microfluidic Probe: Operation and Use for Localized Surface Processing. J. Vis. Exp. (28), e1418, doi:10.3791/1418 (2009).