I denna video presenterar vi mikroflödessystem sond<sup> 1</sup> (MFP). Vi förklarar i detalj hur man monterar MFP, montera den på toppen av ett inverterat mikroskop, och rikta in det i förhållande till underlaget ytan, och slutligen visar hur man använder det för att bearbeta ett substrat yta nedsänkt i en buffertlösning.
Abstract
Mikroflödessystem enheter gör analyser som ska utföras med små mängder av prov och har nyligen använts för att styra mikromiljö av celler. Mikrofluidik är ofta förknippad med slutna mikrokanaler som begränsar deras användning till prover som kan införas, och odlade i fallet av celler inom en begränsad volym. Å andra sidan har micropipetting system som använts för att lokalt BEGJUTA celler och ytor, bland annat med hjälp av push-pull konfigurationer där en pipett fungerar som källa och den andra som sjunker, men förlossning av flödet är svårt i tre dimensioner. Dessutom pipetter är ömtåliga och svåra att placera och därför används i statisk konfiguration bara.
Den mikroflödessystem sond (MFP) kringgår de begränsningar som för konstruktion av slutna mikroflödessystem kanaler och istället för att bifoga provet i mikroflödessystem kan mikroflödessystem flödet direkt levereras på prov, och skannade hela provet med hjälp av MFP. . Injektionen och öppningar strävan ligger inom några tiotals mikrometer i varandra så att en microjet sprutas in i gapet är begränsad av de hydrodynamiska krafterna i den omgivande vätskan och helt aspireras tillbaka i den andra öppningen. Den microjet kan spolas över substratet ytan och ger ett exakt verktyg för lokal deponering / leverans av reagens som kan användas över stora områden genom att skanna sonden över ytan. I denna video presenterar vi mikroflödessystem givare 1 (MFP). Vi förklarar i detalj hur man monterar MFP, montera den på toppen av ett inverterat mikroskop, och rikta in det i förhållande till underlaget ytan, och slutligen visar hur man använder det för att bearbeta ett substrat yta nedsänkt i en buffert.
Protocol
1. Mikrofabrikation av sonden huvudet (processen inte visas i videon) En Si 2 rånet, fyra inches i diameter, 525 ìm tjocka, med ett 1 mm tjockt termisk SiO2 lager spincoated med fotoresist (PR) för 45 sekunder vid 4000 rpm. Skivan är prebaked på 110C i 50 s och exponeras genom en mask med alla de element (hamnar och mikrokanaler) i 5 s, utvecklats och sköljas i DI. Den avslöjade SiO2 etsas bort i en 1:07 buffrad fluorvätesyra (BHF) lösning i ≈ 15 min (dewetting av sub…
Discussion
Den mikroflödessystem sond (MFP) är mångsidigt eftersom det är (i) mobil, (ii) anpassningsbar för att användas med olika typer av reagenser och substrat och det kan (iii) att drivas över stora områden.
Oönskade bubblor kan leda till störningar av flödet för att undvika bubblor, alla komponenter behöver fyllas med vätska före montering. Gapet mellan sonden och ytan är bara några mikrometer, ändå Mesa är flera hundra mikrometer breda och avstånd i intervallet centimeter sk…
Acknowledgements
Detta arbete har finansierats av Fonds de Recherche sur la Nature et les Technologies de Quebec, Kanada fundament för innovation och den kanadensiska Institutes of Health Research (CIHR).
Perrault, C. M., Qasaimeh, M. A., Juncker, D. The Microfluidic Probe: Operation and Use for Localized Surface Processing. J. Vis. Exp. (28), e1418, doi:10.3791/1418 (2009).